本发明公开了一种环状芽孢杆菌壳聚糖酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)中的壳聚糖酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的壳聚糖酶编码基因进行高效分泌表达，获得环状芽孢杆菌壳聚糖酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的壳聚糖酶对壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.77mg)降解5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要来源于枯草芽孢杆菌的中性蛋白酶150mg，理论上效率提高近200倍；具有良好的工业应用前景。
本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌壳聚糖酶及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)中的壳聚糖酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的壳聚糖酶编码基因进行高效分泌表达，获得解淀粉芽孢杆菌壳聚糖酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的壳聚糖酶对壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.23mg)降解5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要α‑淀粉酶150mg，理论上效率提高600倍以上；具有良好的工业应用前景。
本发明公开了一种热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族)及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了热紫链霉菌(Streptomyces thermoviolaceus)中的几丁质酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质酶编码基因进行高效分泌表达，获得热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族)，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的热紫链霉菌几丁质酶(GH18家族)对低脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.20mg)降解0.5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要商品纤维素酶100mg，理论上效率提高约500倍；具有良好的工业应用前景。
本发明公开了一种热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族)及其制备方法和应用。本发明根据毕赤酵母密码子偏爱性，利用全基因合成方法获得了热紫链霉菌(Streptomyces thermoviolaceus)中的几丁质酶编码基因序列，优化后的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。进一步利用毕赤酵母表达系统对该所述优化的几丁质酶编码基因进行高效分泌表达，获得热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族)，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的热紫链霉菌几丁质酶(GH19家族)对低脱乙酰度的壳聚糖底物有较高的水解活性，摇瓶发酵产生的粗酶液即具有1mL(蛋白质含量约0.30mg)降解0.5g壳聚糖的水解能力，而降解相同量的壳聚糖约需要商品纤维素酶100mg，理论上效率提高300倍以上；具有良好的工业应用前景。
