本发明属于生物检测的技术领域,具体涉及一种用于检测鰤诺卡氏菌的RPA引物、探针以及检测方法。所述RPA引物中引物F和R的核酸序列分别如序列表SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,所述探针的核酸序列如序列表SEQ ID NO.3所示。本发明的用于检测鰤诺卡氏菌的RPA引物和探针,从临床判断为感染或疑似感染鰤诺卡氏菌组织中快速准确地检测岀鰤诺卡氏菌,该方法体现出较强的特异性,以及其检测灵敏度均较常规PCR更高,检测限度达到60 pg/μL,还可以对不同来源的鰤诺卡氏菌进行检测,这对鰤诺卡氏菌病的早期诊断、早期治疗等方面具有重要意义,同时还可以免除高昂的仪器投入,便于基层推广使用。