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[发明专利]一种基于高通量测序鉴定小麦赤霉和茎基腐病菌种、毒素类型和多菌灵抗性的检测方法-CN202210901847.1在审
发明人：张昊;杨美欣;冯洁;徐进;许景升 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2022-07-28 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明涉及农作物病害检测、鉴定及防治技术领域，公开了一种基于高通量测序鉴定小麦赤霉和茎基腐病菌种、毒素类型和多菌灵抗性的检测方法。包括以下步骤：S1：扩增小麦赤霉病菌或茎基腐病菌目的基因片段；S2：混合扩增产物，在Illumina平台上进行高通量双端测序；S3：采用Python脚本一步自动化完成数据拆分、序列比对、比对文件转换排序、变异检测和基因分析。同时，脚本自动统计分型结果，根据特异性SNP位点鉴定引起赤霉病菌和茎基腐病菌的11个种镰孢菌、3种毒素化学型以及对4种杀菌剂多菌灵的抗药突变类型。开发的特异性barcode标签，可以在1个扩增子文库中特异性标记384个菌株。本方法适合大量病原菌的高通量检测，能够为区域性病害防控策略的制定提供重要依据。
一种基于通量鉴定小麦茎基腐病菌种毒素类型多菌灵抗性检测方法

[发明专利]一种单端孢霉烯族毒素的LAMP检测引物组合及其LAMP检测试剂盒和LAMP方法-CN201510237873.9在审
发明人：张昊;冯洁;徐进;许景升 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2015-05-12 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测单端孢霉烯族毒素的LAMP引物组合和LAMP检测试剂盒和LAMP检测方法。该LAMP引物组合由正向外引物F3，反向外引物B3，正向内引物FIP，反向内引物BIP，正向环引物LB和反向环引物RB组成。本发明的检测方法可同时检测所有单端孢霉烯族毒素，并且特异性强、准确性高、操作简便、实用性好、实现了等温扩增，可用于单端孢霉烯族毒素的高灵敏度快速检测，易于大规模推广。
一种单端孢霉烯族毒素 lamp 检测引物组合及其试剂盒方法

[发明专利]一种快速鉴定烟草品种青枯病抗性的方法-CN201610001625.9在审
发明人：顾钢;徐进;冯洁;陈顺辉;许景升;张昊;周挺 -专利权人：中国烟草总公司福建省公司
申请日： 2016-01-05 - 公布日： 2016-05-11 - 主分类号： A01G7/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速鉴定烟草品种青枯病抗性的方法，挑选在1/2 MS培养基上生长至4～6叶龄期，植株大小相近一致的无菌烟苗各10株，超净工作台内去除干净根系周围附着的MS培养基，以剪刀伤根后将植株根部于细菌悬浮液中浸泡30min后，灭菌滤纸吸干根部表面多余的菌液，重新栽回MS培养基内，灭菌水浸根作为对照，30℃、光照度2600lx、16h光周期条件培养，隔天观察记载发病病情，根据病情严重度计算病情指数。
一种快速鉴定烟草品种青枯病抗性方法

[发明专利]青枯菌2号小种的特异性PCR检测方法-CN201010534457.2无效
发明人：田茜;冯洁;徐进;许景升;潘哲超;张昊;张丽勍 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2010-11-08 - 公布日： 2012-05-23 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明专用于检测青枯菌2号小种，属于植物检疫技术领域。该方法根据基因序列比对获得的青枯菌2号小种与其它小种间的差异序列，自主设计了1对特异性引物，可特异性地从青枯菌2号小种菌株中扩增出片段长度为481bp的单一目的条带。本发明采用1对特异性引物，进行一次PCR扩增反应，利用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，即可直接根据产物片断的长度检测出青枯菌2号小种。
青枯菌号小种特异性 pcr 检测方法

[发明专利]一种同时检测三类镰刀菌毒素的快速分子检测方法与应用-CN200910250238.9无效
发明人：张昊;冯洁;徐进;许景升;潘哲超;张力勍;田茜 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2009-12-09 - 公布日： 2011-06-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明专用于检测三类最常见的镰刀菌毒素，属于植物检疫技术领域，具体的说涉及一种镰刀菌毒素的分子检测技术领域。该方法根据镰刀菌基因组内与毒素合成密切相关的Tri11基因，自行设计一组复合引物，从中国和国外采集得到的镰刀菌中检测分离得到镰刀菌毒素NIV、15ADON和3ADON的特异片段，该片段全长分别为643bp、424bp和342bp。本发明仅仅采用一组特异性引物，进行一次PCR扩增反应，利用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，直接根据产物片断的长度，即可检测出禾谷镰刀菌产生的三种B型毒素的类型，本发明可应用于谷物、饲料和食品安全中毒素DON和NIV污染的检测。
一种同时检测镰刀毒素快速分子方法应用

[发明专利]用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法-CN200510064520.X无效
发明人：冯洁;许景升;徐进;何礼远;张争;张杨 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2005-04-13 - 公布日： 2005-11-30 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明用于检测梨火疫病菌的一步双重PCR方法，适用于检测梨火疫病菌。属于农作物病害防治和植物检疫技术领域。该方法根据梨火疫病菌的pEA29质粒和基因组ams基因序列，设计二对特异性引物，在同一反应体系中同时检测梨火疫病菌，扩增产物大小分别为1.0kb和1.5kb，这两对引物的检测灵敏度达到了3个细菌细胞。是对梨火疫病菌pEA29质粒特异性引物检测方法的补充和改进。对于不含有pEA29质粒的梨火疫病菌菌株也可以进行检测。同时，本方法采用双重PCR技术，二对引物在同一反应体系中同时扩增，提高了检测的准确性，节约了检测时间，可以试剂盒的形式在我国口岸大规模推广。
用于检测疫病一步双重 pcr 方法

[发明专利]一种小麦黄矮病候选抗性基因及其编码蛋白与应用-CN03149801.9无效
发明人：张增艳;辛志勇;许景升;刘耀光;王晓萍;林志珊;张群宇 -专利权人：中国农业科学院作物育种栽培研究所
申请日： 2003-07-25 - 公布日： 2005-01-26 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种小麦黄矮病候选抗性基因及其编码的蛋白质。本发明所提供的小麦黄矮病候选抗性基因，是下列核苷酸序列之一：1)序列表中的SEQ ID №：1；2)与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列具有90％以上同源性的DNA序列。本发明所提供的小麦黄矮病候选抗性基因编码的蛋白质，它是序列表中SEQ ID №：2和/或SEQ ID №：3的氨基酸残基序列或将SEQ ID №：2和/或SEQ ID №：3的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有与SEQ ID №：2和/或SEQ ID №：3相同活性的由SEQ ID №：2和/或SEQ ID №：3衍生的蛋白质。可以将本发明的小麦黄矮病候选抗性基因导入小麦等植物中，使其获得抗黄矮病特性。本发明的小麦黄矮病候选抗性基因在植物黄矮病防治中具有重要的作用。
一种小麦黄矮病候选抗性基因及其编码蛋白应用

[发明专利]一种小麦抗黄矮病基因Bdv2的PCR标记及其应用-CN03146706.7无效
发明人：张增艳;辛志勇;陈孝;徐惠君;许景升;杜丽璞;林志珊;徐勤娟;马有志 -专利权人：中国农业科学院作物育种栽培研究所
申请日： 2003-07-09 - 公布日： 2005-01-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种小麦抗黄矮病基因Bdv2的标记及其应用。该基因的RAPD标记OPD04₁₃₀₀的核苷酸序列为下述序列之一：1)与序列表中的SEQ ID №：1限定的DNA序列具有90％以上同源性的DNA序列；2)与序列表中的SEQ ID№：1互补的DNA序列；3)序列表中的SEQ ID №：1。本发明将OPD04₁₃₀₀转化为稳定的SCAR标记SC－D04，即与序列表中的SEQ ID №：2、3限定的DNA序列具有90％以上同源性的序列。本发明中的SCAR标记SC－D04可用于检测转育后代植株，克服了那些由于表型鉴定困难用通常的方法辅助选择工作量非常巨大的困难，实践了组织培养和分子标记辅助育种相结合、缩短育种周期的技术路线。
一种小麦抗黄矮病基因 bdv2 pcr 标记及其应用

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