本发明公开了一种生产7‑氨基去乙酰氧基头孢烷酸的方法。该方法包括如下步骤：向酿酒酵母BY4741中导入SEQ ID No：3所示的pcbCsc基因、SEQ ID No：6所示的penDEen、SEQ ID No.12所示的cefEsc9skl、Symbiodiniummicroadriaticum来源的pcbAB基因和Aspergillus nidulans来源的npgA基因，从而获得用于生产7‑ADCA的工程菌；发酵培养工程菌，收集发酵菌体；破碎发酵菌体，离心，收集菌体破碎后的上清液；菌体破碎后的上清液中含有7‑ADCA。本发明制备的重组酿酒酵母DM282的菌体破碎后上清液中7‑ADCA的产量达到2.28mg/g。本发明具有重要的应用价值。
本发明提供一种扩环酶及其突变体在生产G‑7‑ADCA中的应用。其氨基酸序列如SEQ ID No.5‑13之一所示。本发明通过NCBI序列比对、挖掘，以及定向进化等技术产生了一系列的具有扩环活性的酶，这些酶能够将底物青霉素G一步扩环为G‑7‑ADCA；G‑7‑ADCA可以再通过青霉素酰化酶的作用，脱去侧链，转化为7‑ADCA。因此，这些扩环酶在工业上具有重要的应用价值。
