本发明提供了用于筛查变形杆菌属的分子靶标,所述分子靶标为4段核苷酸片段,所述核苷酸片段的序列如SEQ ID NO:1~4所示,还提供了用于检测所述分子靶标的引物组,以及对应的PCR检测方法。本发明的检测方法可检测到更多的变形杆菌,变形杆菌属覆盖率更大,增强了实用性;本发明的检测方法针对变形杆菌检测具有操作简单、结果判定易、检测时间短、特异性强、成本低、稳定性好的优点。
本发明公开了用于鉴别肠球菌属内四个种的特异性分子靶标及其快速检测方法,分子靶标为:碱基序列SEQ ID NO.1‑7为酪黄肠球菌的分子靶标、碱基序列SEQ ID NO.8‑27为粪肠球菌的分子靶标、碱基序列SEQ ID NO.28‑32为屎肠球菌的分子靶标、碱基序列SEQ IDNO.33‑58为希拉肠球菌的分子靶标。检测方法:根据58个特异性分子靶标中的任一个分子靶标来设计特异性扩增引物对;提取样品DNA,PCR法扩增;凝胶电泳检测扩增产物,如电泳结果出现相应的单一扩增条带,则判断样品中含有目标菌,反之则判断样品中不含目标菌。该检测方法具有检测时间短、成本低、操作简单、特异性强等优点。
本发明提供了用于检测食源性致病菌的特异性分子靶标,所述特异性分子靶标的核苷酸序列如SEQ ID NO:1~31所示。本发明还提供了一种食源性致病菌活菌的检测方法,包括以下步骤:步骤1:在待测样品加入PMA染料溶液;步骤2:提取待测样品中的菌体DNA;步骤3:以步骤2中的菌体DNA为模板,进行实时荧光定量PCR检测;步骤4:待反应结束后,将获得的荧光定量PCR扩增的曲线和Ct值与建立的标准曲线计算样品中食源性致病菌活菌的数量。本发明的检测方法具有检测时间短,无须经过传统的培养增菌过程,不受样品中食源性致病菌标准菌株死菌干扰,准确检测并定量样品中食源性致病菌标准菌株的具体含菌数量。
本发明提供了用于筛查黄杆菌属的分子靶标,所述分子靶标为核苷酸片段,所述核苷酸片段的序列如SEQ ID NO:1所示,还提供了用于检测所述分子靶标的一对引物,以及对应的PCR检测方法。本发明的检测方法可检测到更多的黄杆菌属,覆盖率更大,增强了实用性;本发明的检测方法针对黄杆菌检测具有操作简单、结果判定易、检测时间短、特异性强、成本低、稳定性好的优点。