本发明提供了制备烟酸或其衍生物的核苷、烟酸腺嘌呤二核苷酸、烟酸单核苷酸的方法、酶组合物及应用。所述制备烟酸或其衍生物的核苷的方法包括使用5’‑核苷酸酶以烟酸或其衍生物的单核苷酸或其盐为底物进行反应，其中所述5’‑核苷酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的方法比化学合成的方法更安全和可靠，由于可以避免使用有机溶剂，因此更加环保。本发明能够更有效地生产烟酰胺核苷，以应付日益增长的需求。
本发明提供了青霉素扩环酶突变体、编码该突变体的DNA、含有该突变体的试剂盒及其应用。所述青霉素扩环酶突变体的氨基酸序列以序列表中的SEQ ID NO.:2为参考序列，具有位于第42位苏氨酸和第126位谷氨酰胺中的至少一者的突变，所述第42位苏氨酸突变为除其自身以外其他天然氨基酸中的任一者，所述第126位谷氨酰胺突变为除其自身以外其他天然氨基酸中的任一者。本发明的青霉素扩环酶突变体具有提高的催化活性和耐热性，更适于商业和工业应用。
本发明提供了头孢菌素羟化酶突变体、编码该突变体的DNA、使用该突变体的方法及其应用。所述头孢菌素羟化酶突变体的氨基酸序列以序列表中的SEQ ID NO.:2为参考序列，具有位于第29位甘氨酸、第40位丙氨酸、第41位甘氨酸、第182位精氨酸和第272位苏氨酸中的至少一者的突变，并且与野生型头孢菌素羟化酶相比，所述头孢菌素羟化酶突变体的酶活性高至少10％，耐热性高至少150％。本发明的头孢菌素羟化酶突变体具有提高的催化活性和耐热性，更适于商业和工业应用。
本发明提供了制备β‑烟酰胺单核苷酸的方法、酶组合物及其应用。所述方法包括以下步骤：1)提供微生物的提取物，其中所述微生物的提取物中包含氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸；2)将烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二磷酸酶与所述微生物的提取物混合，使所述烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二磷酸酶与所述氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸反应，生成β‑烟酰胺单核苷酸和AMP；其中所述烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二磷酸酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的方法不仅能够提高产能，还能够实现绿色生产，总体上创造可观的经济成果。
