本发明公开了一种猪细小病毒7型SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,包括如下步骤:S1、制备特异性引物;根据Gen Bank登录的PPV7(Gen Bank:KU563733.1)Cap基因核苷酸序列,设计用于PPV7的特异性引物(F1、R1);PPV7特异性引物上游引物F1:PPV7‑F1(5'‑GCGACCAGTCGAAAGTCTTC‑3'),PPV7特异性引物下游引物R1:PPV7‑R1(5'‑TTGGTGTTGCCCATTCTGTA‑3'),扩增核酸片段大小为169bp;S2、重组质粒标准品制备并提取DNA;本发明为建立一种能够快速、特异、敏感、简便、特异性好的检测猪细小病毒7型的SYBR Green I荧光定量PCR方法,本发明根据Gen Bank登录的PPV7(Gen Bank:KU563733.1)Cap基因核苷酸序列,设计一对用于PPV7的特异性引物,扩增169bp的PPV7衣壳蛋白基因,构建重组质粒,以其作为标准品建立了SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,得到标准曲线、溶解曲线,并对灵敏性、特异性和重复性进行验证。