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[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒超滤纯化系统-CN202210327192.1有效
发明人：李阳;沈建军;彭俊平;胡永明;娄坤鹏;张秀文;陈雪;屈建;王悦芸 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： B01D61/14 文献下载
摘要：本发明涉及病毒繁殖技术领域，尤其涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒超滤纯化系统，包括通过管道依次连接的第一浓缩罐、第二浓缩罐和第三浓缩罐，所述第一浓缩罐前设置有微滤器，所述第一浓缩罐和第二浓缩罐之间设置有第一超滤膜包，第二浓缩罐和第三浓缩罐之间设置有第二超滤膜包，所述第一超滤膜包和第二超滤膜包内分别安装有第一超滤膜、第二超滤膜，所述第一超滤膜的孔径大于目标病毒的分子量，所述第二超滤膜的孔径小于目标病毒的分子量。本发明的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒超滤纯化系统，通过设置的三级过滤纯化系统，能够将疫苗中的无效蛋白去除95％以上，能够有效提高抗原纯度，减少动物对疫苗的应激反应。
种猪繁殖呼吸综合征病毒超滤纯化系统

[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫增强剂及其制备方法-CN202011077976.0有效
发明人：沈建军;陈雪;张秀文;屈健;陈芳;李阳 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2020-10-10 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明涉及灭活疫苗技术领域，公开了一种猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫增强剂及其制备方法，所述增强剂包括0.15‑1.2mg/mL的单磷酰脂质A、0.5‑0.9mg/mL的β‑葡聚糖和10‑50mg/mL的猪源细胞质多肽；按质量份数所述单磷酰脂质A为6‑12份、β‑葡聚糖7‑11份和猪源细胞质多肽10‑18份；所述制备方法为将含有单磷酰脂质A、猪源细胞质多肽和β‑葡聚糖的混合液与吐温‑80混合，得到水相溶液；然后将白油和司盘‑80混合，得到油相溶液；最后将水相溶液与油相溶液混合乳化后，得到灭活疫苗免疫增强剂。本发明能够提高猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的免疫时间，并提高抗体水平。
种猪繁殖呼吸综合征疫苗免疫增强及其制备方法

[发明专利]一种鸡传染性法氏囊病毒的全悬浮培养方法-CN202010813439.1有效
发明人：李阳;沈建军;张秀文 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2020-08-13 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明涉及疫苗制备技术领域，公开了一种鸡传染性法氏囊病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：S1、取冷冻复苏的鸡胚细胞，离心；S2、将细胞悬液置入到培养瓶中，并将培养瓶放置于轨道摇床上；S3、对步骤S2中的鸡胚细胞每间隔3h取样一次进行细胞计数，监测细胞生长情况；S4、鸡传染性法氏囊病病毒的接种，接毒完成后，将培养瓶放置于CO2培养箱中，补加牛血清，并放回到CO2培养箱中，在混合培养液中插入阳极电极板和阴极电极板并通第二直流电，并在搅拌状态下进行继续培养；S5、接毒后，每隔6h取样测定病毒的TCID50，在病毒TCID50达到最高时收获病毒并保存。本发明能够能够在更短的时间培养出悬浮培养鸡传染性法氏囊病病毒，利于工厂化的大规模生产。
一种传染性法氏囊病毒悬浮培养方法

[发明专利]一种猪A型塞内卡病毒灭活疫苗及其制备方法-CN202210301705.1在审
发明人：沈建军;项伟;张秀文;彭俊平;胡永明;娄坤鹏;王悦芸;陈雪;严成;李阳 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2022-03-25 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号： A61K39/125 文献下载
摘要：本发明涉及兽用生物制品技术领域，尤其涉及一种猪A型塞内卡病毒灭活疫苗及其制备方法，所述灭活疫苗包括塞内卡病毒灭活抗原液和疫苗佐剂，所述塞内卡病毒灭活抗原液和疫苗佐剂的质量比为1:1.8～1:2.3，所述塞内卡病毒灭活抗原液中分散有球状纳米氧化锌，所述疫苗佐剂包括18～25重量份的亲油性表面活性剂、75～115重量份的亲水性表面活性剂、855～890重量份的白油、0～8.5重量份的稳定剂、0～2.5重量份的免疫增强剂。本发明制备得到的猪A型塞内卡病毒灭活疫苗安全有效，可用于有效预防猪塞内卡病的发生。
种猪型塞内卡病毒疫苗及其制备方法

[发明专利]一种猪圆环病毒2型悬浮培养用培养基及其应用-CN202210327195.5在审
发明人：项伟;沈建军;陈雪;张秀文;王悦芸;彭俊平;胡永明;娄坤鹏;李阳 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2022-06-10 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明涉及病毒繁殖技术领域，尤其涉及一种猪圆环病毒2型悬浮培养用培养基及其应用，本发明的一种猪圆环病毒2型悬浮培养用培养基，包括以下重量份原料：DMEM培养基85‑95份、片状载体2‑5份、微量元素10‑20份、维生素0.5‑2份、氨基酸1‑3份，所述片状载体是以改性载体纤维经过压合、剪切制成，所述改性载体纤维为葛根纤维经过聚乙二醇改性而得。本发明制备得到的一种猪圆环病毒2型悬浮培养用培养基，不仅能够为细胞繁殖培养提供营养物质，同时能够调整培养基贴壁因子，使得细胞适应悬浮培养，培养出免疫原性良好的圆环病毒。
种猪圆环病毒悬浮培养培养基及其应用

[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒的分离培养方法-CN201710771253.2有效
发明人：李阳;沈建军;张秀文 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2017-08-31 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：一种猪流行性腹泻病毒的分离培养方法，属于兽用生物制品技术领域。其包括从临床疑似PED患病仔猪采集肠道内容物和粪便，分别加入生理盐水，并将肠道内容物匀浆，粪便样品进行振荡混匀，再加入病毒处理溶液，混合均匀，静置，离心，取上清，先经微孔滤膜进行过滤处理，再微孔滤膜进行过滤，即得PEDV病毒原液；取已培养24h贴壁生长良好的Vero细胞，弃去细胞培养液，将PEDV病毒原液与维持液接种至细胞瓶内，将细胞瓶置于培养箱中培养，每天观察细胞病变，收集病变明显的细胞培养液，置于‑20℃保存。本发明提出的分离培养方法成本低廉，分离周期短，有利于猪流行性腹泻病毒病的及时诊断和研究。
种猪流行性腹泻病毒分离培养方法

[发明专利]一种特异性抑制猪瘟病毒增殖的小分子多肽及其应用-CN201711105084.5有效
发明人：张秀文;李阳;沈建军 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2017-11-10 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C07K7/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种特异性抑制猪瘟病毒增殖的小分子多肽及应用。其公开了一种特异性抑制猪瘟病毒增殖的小分子多肽的结构及应用。本发明具有以下有益效果：合成成本低，使用方便安全，可以有效的抑制猪瘟病毒的增殖，还可以与疫苗同用，可以大大提高疫苗抗体效价，延长抗原在体内的时间，从而延长疫苗的免疫保护期。
一种特异性抑制猪瘟病毒增殖分子多肽及其应用

[发明专利]一种特异性提高猪瘟疫苗免疫效果的小分子多肽及其应用-CN201711105085.X有效
发明人：李阳;沈建军;张秀文 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2017-11-10 - 公布日： 2021-06-25 - 主分类号： C07K7/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种特异性提高猪瘟疫苗免疫效果的小分子多肽及其应用。其公开了特异性提高猪瘟疫苗免疫效果的小分子多肽的结构和应用。本发明具有以下有益效果：合成成本低，而且对各种年龄的猪都可使用，均无毒副作用，可以刺激机体的细胞免疫和体液免疫，进而大大提高疫苗抗体效价，还可以延长抗原在体内的时间，从而延长疫苗的免疫保护期。
一种特异性提高猪瘟疫苗免疫效果分子多肽及其应用

[发明专利]一种特异性提高猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果的小分子多肽及其应用-CN201711105097.2有效
发明人：沈建军;张秀文;李阳 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2017-11-10 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C07K7/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种特异性提高猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果的小分子多肽及其应用。其公开了一种特异性提高猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫效果的小分子多肽的结构及应用。本发明具有以下有益效果：合成成本低，而且对各种年龄的猪都可使用，均无毒副作用，可以刺激机体的细胞免疫和体液免疫，进而大大提高疫苗抗体效价，还可以延长抗原在体内的时间，从而延长疫苗的免疫持续期。
一种特异性提高繁殖呼吸综合征疫苗免疫效果分子多肽及其应用

[发明专利]一种猪伪狂犬病毒的分离方法-CN201710640855.4有效
发明人：沈建军;张秀文;李阳;冷春青 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2017-07-31 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：一种猪伪狂犬病毒的分离方法，属于兽用生物制品技术领域。其包括以下步骤：1）病料的处理；2）动物接种；3）细胞接种；4）病毒鉴定。本发明具有以下有益效果：本发明所提出的一种猪伪狂犬病毒的分离方法，病料采集范围广且方便，可以实现对隐形感染活体猪的病毒分离；可以获的高纯化水平、病毒含量均高的病毒；大大缩短了病毒分离时间，利于猪伪狂犬病及时诊断和研究。
种猪狂犬病毒分离方法

[发明专利]一种胞内劳森菌分离方法-CN201710772671.3有效
发明人：沈建军;张秀文;李阳 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2017-08-31 - 公布日： 2021-03-16 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一种猪胞内劳森菌的分离培养方法，属于兽用生物制品技术领域。其包括以下步骤：病料的采集与处理；小鼠的肠上皮原代细胞进行贴壁培养；分离细菌培养。本发明具有以下有益效果：本发明所改变了传统的病料处理方法，省去了以往繁琐的操作步骤，提出了一种新的细菌分离液，大大缩短了细菌的分离时间；提出了应用胎鼠的肠上皮原代细胞用来培养细菌，为胞内劳森菌提供了一个模拟体内的体外培养环境，增加了分离细菌的成功率；应用微需氧产气袋进行培养，解决了价格昂贵的智能多气培养箱的问题，大大降低了细菌分离成本。
一种胞内劳森菌分离方法

[发明专利]一种猪伪狂犬病活疫苗免疫增强稀释液及其使用方法-CN202011119682.X在审
发明人：沈建军;张秀文;陈雪;周蕾;陈芳;李阳 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2020-10-19 - 公布日： 2021-01-15 - 主分类号： A61K39/39 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪伪狂犬病活疫苗免疫增强稀释液及其使用方法，涉及兽用生物制品技术领域。本发明的一种猪伪狂犬病活疫苗免疫增强稀释液及其使用方法，所述稀释液中包含：VSP70、61vg、黄芪提取物、人参提取物、L‑谷氨酸钠、芍药苷、生理盐水，具体的，每1000ml所述稀释液中包含VSP701‑3g、61vg 1‑2g、黄芪提取物15‑20g、人参提取物4‑8g、L‑谷氨酸钠0.5‑1g、芍药苷10‑15g、余量为生理盐水。本发明公开了一种猪伪狂犬病活疫苗免疫增强稀释液及其使用方法，可有效增强疫苗的免疫效果，能够明显提高免疫后的细胞免疫水平和体液免疫水平。
种猪狂犬病疫苗免疫增强稀释液及其使用方法

[发明专利]一种鸡传染性法氏囊病活疫苗冻干保护剂的制备方法-CN202010819267.9在审
发明人：李阳;沈建军;张秀文 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2020-08-14 - 公布日： 2020-12-25 - 主分类号： A61K9/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病活疫苗冻干保护剂的制备方法，涉及兽用生物制品技术领域。本发明的一种鸡传染性法氏囊病活疫苗冻干保护剂的制备方法，包括预处理‑提取‑脱色除杂‑纯化‑浓缩、干燥‑保护剂的制备步骤，其中在纯化步骤中加入了絮凝剂进行纯化，所述絮凝剂为蒙脱土负载的精氨酸改性壳聚糖。本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病活疫苗冻干保护剂的制备方法，利用机械破壁和物理破壁相结合的方式，对中草药进行破壁处理，提取率高，且采用树脂脱色除杂和絮凝纯化技术相结合，提取得到的目的物纯度也较高。
一种传染性法氏囊病活疫苗保护制备方法

[发明专利]一种猪细小病毒的分离方法-CN201710640851.6有效
发明人：沈建军;张秀文;李阳;冷春青 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2017-07-31 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：一种猪细小病毒的分离方法属于兽用生物制品技术领域。其包括以下步骤：1）CEF原代细胞的制备；2）病料的采集与处理；3）病毒的细胞接种；4）病毒鉴定。本发明具有以下有益效果：本发明所提出的一种猪细小病毒的分离方法，病料的处理方法无需冻融，机械化程度高，省时省力；提供一种猪细小病毒培养的易感原代细胞，CEF原代细胞制备简单快速，成本低廉，还大大缩短了病毒的分离周期，有利于猪细小病毒病的及时诊断和研究。
种猪细小病毒分离方法

[发明专利]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离方法-CN201710639470.6有效
发明人：沈建军;张秀文;李阳;冷春青 -专利权人： 浙江美保龙生物技术有限公司
申请日： 2017-07-31 - 公布日： 2020-11-17 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：一种猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离方法属于兽用生物制品技术领域。其包括以下步骤：1）PAM原代细胞的制备；2）病料的采集与处理；3）病毒的细胞接种；4）病毒鉴定。本发明具有以下有益效果：本发明所提出的一种猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离方法，病料的处理方法无需冻融，机械化程度高，省时省力；提供一种猪繁殖与呼吸综合征病毒培养的易感原代细胞，PAM原代细胞制备简单快速，成本低廉，还大大缩短了病毒的分离周期，有利于猪繁殖与呼吸综合征病毒病的及时诊断和研究。
种猪繁殖呼吸综合征病毒分离方法

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