本发明公开一组检测锥虫属原虫的特异性引物,其序列为:上游引物为:5’‑CCTGATGAAAGGTGCAATG(SEQ ID NO:1)或其互补序列;下游引物为:5’‑CGTTTTCGCCTTCTTGTGGA(SEQ ID NO:2)或其互补序列。本发明还公开一种对锥虫属原虫进行特异性检测的方法,包括以下步骤:(1)提取目标样本的基因组DNA;(2)以步骤(1)中所提取的目标样本的基因组DNA作为模板,用本发明提供的特异性引物进行PCR扩增;(3)对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳实验,观察目标位置是否出现特异性条带。本发明提供的检测锥虫属原虫的特异性引物及检测方法,能够快速准确的检测出目标样品中是否含有锥虫属原虫,该检测方法的属内通用性高,属间特异性强,可专门针对锥虫属原虫进行有效的检测。本发明还提供上述引物的应用。
本发明公开了一种RPA‑LFD可视化快速检测血吸虫核酸的引物、探针、试剂盒及方法,引物序列如SEQ ID NO.1~2所示,探针序列如SEQ ID NO.3所示。本发明以SjCHGCS19基因为靶序列设计了RPA引物及探针,并采用RPA扩增技术结合侧流层析试纸条法,实现了血吸虫核酸的敏感、快速可视化检测。本发明中的检测方法对日本血吸虫基因组DNA检测限可达1fg并有望用于曼氏血吸虫及埃及血吸虫的通用检测,该方法可检出感染早期小鼠血清中血吸虫循环核酸,操作简单且快速,无需特殊仪器,反应温度与室温接近,可肉眼观察结果,有利于实现现场血吸虫中间宿主的早期敏感快速检测,及血吸虫病传播风险高危环境的及时敏感监测。