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[发明专利]诱导肝细胞分化为胆管细胞的培养方法及所使用的孵育液-CN202310458721.6在审
发明人：高毅;黎少;欧楚澎;彭青;李阳 -专利权人：广东乾晖生物科技有限公司
申请日： 2023-04-24 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请公开一种能诱导肝细胞分化为胆管细胞的孵育液及所使用的孵育液。孵育液包括：雷帕霉素，终浓度为1～20μM；表皮生长因子，终浓度为5～10ng/ml；DMSO，终浓度不超过0.1％；余量为基础培养基。进一步地，本申请还利用前述的孵育液提供一种诱导肝细胞分化为胆管细胞的培养方法：活化目标肝细胞；配制孵育液，用于诱导目标肝细胞分化为胆管细胞；利用所述孵育液对所述活化后的目标肝细胞进行预设天数的连续培养，所述预设天数为5～12天。本申请的孵育液成分简单，诱导方法操作简单、诱导成功率高，适用性广。
诱导肝细胞化为胆管细胞培养方法使用孵育

[发明专利]无血清细胞培养体系及其细胞消化终止液-CN202310667938.8在审
发明人：高毅;黎少;欧楚澎;彭青;李阳 -专利权人：广东乾晖生物科技有限公司
申请日： 2023-06-06 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：本申请公开一种细胞消化终止液，用于终止胰蛋白酶对体外贴壁培养细胞的消化进程，其包括以下组分：转铁蛋白，终浓度为5‑10mg/mL；胰岛素，终浓度为1‑5mg/mL；维生C，终浓度为5‑10μM；次黄嘌呤钠，终浓度为5‑10mM；胸苷，终浓度为1‑3mM；非必需氨基酸溶液，稀释至每种氨基酸终含量为0.1mM。本申请具备竞争性结合胰蛋白酶作用，使细胞蛋白和胰蛋白酶结合的机会大大减少，从而起着终止胰蛋白酶消化细胞的效果，有效替血清终止消化的作用，有利于在临床上应用，构建无血清细胞培养体系。
血清细胞培养体系及其细胞消化终止

[发明专利]增强肝细胞功能性的培养方法及所使用的肝细胞培养液-CN202110662219.8有效
发明人：高毅;黎少;欧楚澎;彭青 -专利权人：广东乾晖生物科技有限公司
申请日： 2021-06-15 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请公开一种肝细胞培养液，包括终浓度为1～20μM的地塞米松，终浓度为1～20μM的姜黄素以及基础培养基，具有成分简单和成本低廉的优势，通过定量诱导获得功能增强的肝细胞，加速将其应用于肝病治疗中。本申请的增强肝细胞功能性的培养方法及所使用的肝细胞培养液培养，不仅能够提供足够的营养供目标肝细胞生长，并且还可诱导目标细胞的相关代谢酶和白蛋白基因表达。
增强肝细胞功能培养方法使用培养液

[发明专利]一种三维肝脏类器官复苏液和三维肝脏类器官的复苏方法-CN202111071635.7有效
发明人：高毅;黎少;欧楚澎;彭青 -专利权人：广东乾晖生物科技有限公司
申请日： 2021-09-14 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种三维肝脏类器官复苏液和三维肝脏类器官的复苏方法，涉及细胞复苏液技术领域。该三维肝脏类器官复苏液的组分包括：烟酰胺50‑200mmol/L、胰岛素1‑50μg/ml、肝细胞生长因子1‑50ng/ml、表皮生长因子1‑50ng/ml、地塞米松1‑100μmol/L、胎牛血清8‑12wt%、亚麻酸1‑50μg/ml和极性溶剂0.01‑0.1wt%以及余量的基础培养基。本申请提供的复苏液能够提供足够的营养供类器官内肝细胞维持活性和生长培养。其成分简单，组容易获取、价格相对低廉，并且基础培养基有多种选择，可以适用于各种肝脏类器官，应用范围广，本申请提供的复苏方法简单，可操作性强。
一种三维肝脏器官复苏方法

[发明专利]微凝胶类肝载体及其制备方法-CN202111501319.9在审
发明人：高毅;黎少;欧楚澎;彭青 -专利权人：广东乾晖生物科技有限公司
申请日： 2021-12-09 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请提供一种微凝胶类肝载体及其制备方法，其中，所述微凝胶类肝载体包括由I型胶原蛋白、基质胶交联而成的生物凝胶，所述生物凝胶上携带有肝脏细胞及生长因子，所述肝脏细胞包括肝干细胞、肝脏非实质细胞和肝肿瘤细胞中的一种或两种的组合。本申请的微凝胶类肝载体不仅能够为肝脏细胞提供良好的培养基质，而且携带有肝脏细胞增殖和存活所需的生长因子，并能实现肝脏细胞不同组合方式的装载，为细胞不受限制的快速增殖提供了平台，并且肝脏细胞在经过长时间的培养后不易出现中心细胞坏死的情况，适用于肝脏细胞的体外长期细胞培养，有利于药物筛选和形态发生研究应用。
凝胶载体及其制备方法

[发明专利]支原体清除组合物和处理体外培养细胞的方法-CN202110542011.2在审
发明人：高毅;黎少;欧楚澎;彭青 -专利权人：广东乾晖生物科技有限公司
申请日： 2021-05-18 - 公布日： 2021-09-10 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本申请公开一种支原体清除组合物，包括使用终浓度为10～40μM的红霉素，使用终浓度为10～40μM的氯霉素，使用终浓度为10～40μM的泰乐菌素，使用终浓度为4μg/mL的环丙沙星。本申请适用于去除体外培养的细胞，且联合用药有利于降低细胞的抗药性和抗生素对细胞的毒性，有利于细胞在去除支原体之后恢复细胞原有的生理活性，保证细胞的主要特性不丧失。
支原体清除组合处理体外培养细胞方法