本发明属于分子生物技术领域，具体涉及结核分枝杆菌的检测领域，更具体涉及一种结核分枝杆菌85B mRNA实时荧光RT‑PCR的检测引物组、探针组、试剂盒及检测方法。本发明提供的检测引物组包括SEQ ID NO：1‑4所示的核苷酸序列或SEQ ID NO：7‑10所示的核苷酸序列；检测探针组包括SEQ ID NO：5‑6所示的核苷酸序列或SEQ ID NO：11‑12所示的核苷酸序列。本发明由于引入了特异性扩增引物和荧光探针及与之相匹配的高效PCR热循环反应系统，使得检测的灵敏度和特异性得到很大程度的增强。同时，本发明引入了更适合RNA扩增的Tris‑MOPS‑柠檬酸钠缓冲液以及Stoffel片段和Tfl DNA聚合酶的双聚合酶的扩增方法，提高检测特异性的同时，可耐受更多的模版，提高了检测灵敏度及检测结果的稳定性。
本发明属于生物技术领域，具体涉及病毒检测领域，更具体涉及一种检测人类免疫缺陷病毒1型2‑LTR DNA的PCR引物组、探针及其试剂盒和检测方法。本发明提供的检测引物组包括SEQ ID NO：1‑6所示的核苷酸序列；检测探针包括SEQ ID NO：7‑8所示的核苷酸序列。本发明所提供的检测引物组，与传统的实时荧光定量PCR不同，本发明通过引入3对共6条实时荧光定量PCR引物，采用多个循环，并提高引物退火温度，使本发明提供的HIV‑1 2‑LTR DNA PCR检测方法达到极高的灵敏度及特异性，其中最低检出限可达每个PCR中检测2拷贝/百万细胞。同时，本发明还在PCR反应中加入细胞定量反应体系，即可在同一个PCR反应中同时对HIV‑1 2‑LTR DNA及细胞数进行定量(常规方法需要另外对细胞量进行计数)。
