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[发明专利]一种有效垂钓水稻启动子DNA结合蛋白的方法-CN201811420354.6有效
发明人： 方长旬;杨陆可;李兰兰;张鹏丽;林文雄 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2018-11-26 - 公布日： 2022-03-04 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：本发明提供一种有效垂钓水稻启动子DNA结合蛋白的方法，包括利用含有NP‑40,NaCl,PMSF等的蛋白提取缓冲液提取水稻叶片天然总蛋白，进一步用生物素标记引物并扩增启动子DNA，将启动子DNA与链霉亲和素偶联的磁珠孵育，在此基础上，将启动子DNA与磁珠的复合物与水稻叶片天然总蛋白孵育，得到与启动子DNA结合的蛋白。本方法适用于水稻不同品种的启动子DNA结合蛋白的研究，也可用于研究不同植物启动子DNA的结合蛋白。建立了一种高效、简易获得植物启动子DNA结合蛋白的技术。
一种有效垂钓水稻启动子 dna 结合蛋白方法

[发明专利]一株促进再生稻腋芽萌发生长的解淀粉芽胞杆菌及其应用-CN201910898124.9有效
发明人：陈鸿飞;许丽宁;邵彩虹;方长旬;林文雄 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2019-09-23 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属于植物微生物技术领域，具体涉及一株解淀粉芽胞杆菌ZSY‑3及其作为再生稻根际促生菌株的应用。本发明以再生季稻分蘖数为主要指标，通过筛选得到一株解淀粉芽胞杆菌ZSY‑3，并保存于中国典型培养物保藏中心，实验证明，本发明筛选菌株解淀粉芽胞杆菌ZSY‑3具有一定的固氮、解磷、解钾和产IAA能力，能够有效的作为根际促生菌株，促进再生季稻腋芽萌发生长成穗,有助于提高再生季稻产量。
促进再生腋芽萌发生长淀粉杆菌及其应用

[发明专利]一种全程机械化中低留桩再生稻的栽培方法-CN201710849038.X在审
发明人：陈鸿飞;张志兴;林文雄;黄锦文;方长旬;潘艺萍;林烽 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2017-09-20 - 公布日： 2018-07-20 - 主分类号： A01G22/22 文献下载
摘要：本发明属于农作物栽培技术领域，具体涉及一种全程机械化中低留桩再生稻栽培的方法，其步骤：A.品种选择；B.育秧床土准备；C.秧田准备；D.适时早播；E.播种、育机插秧；F.整地开沟；G.合理密植；H.肥料施用；I.水分管理；J.九黄收割、合理留桩；K.病虫害防治；L.再生季收割。通过本发明在再生稻生产上的应用，缩短全程机械化再生季稻碾压区与非碾压区成熟期差异至10天左右，促进了腋芽萌发，提高了再生季稻产量和稻米品质，大大降低了劳动强度和劳动力投入，节本增效效果明显，促进了农民增产增收。
留桩机械化再生稻再生全程碾压收割农作物栽培再生稻栽培稻米品质肥料施用合理密植节本增效品种选择水分管理腋芽萌发育秧床土秧田病虫害防治机插秧开沟与非早播整地播种栽培增产应用农民生产

[发明专利]一种利用稻秆粉加粘细菌抑制稻田杂草生长的方法-CN201510123478.8有效
发明人： 方长旬;林文雄;李颖哲;李程勋 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2015-03-20 - 公布日： 2017-05-10 - 主分类号： A01G13/00 文献下载
摘要：本发明提供一种利用稻秆粉加粘细菌抑制稻田杂草生长的方法，包括先将干稻秆粉碎过筛后撒施于田块；采用兔粪诱导法从稻田土壤中诱导分离、纯化粘细菌并进行扩大培养，并与灭菌的碎兔粪进行混合后，浇洒于撒施稻草粉的田块，稻草粉与粘细菌相互作用抑制稻田杂草生长，通过这些技术建立了一种操作流程简易，成本低，生态安全性好的稻田除草新方法，能够为稻田绿色安全除草利用开发提供借鉴。
一种利用稻秆粉加粘细菌抑制稻田杂草生长方法

[发明专利]一株用于拮抗太子参专化型尖孢镰刀菌的解淀粉芽孢杆菌-CN201410263153.5有效
发明人：赵永坡;林文雄;吴林坤;张志兴;方长旬;初雷霞 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2014-06-14 - 公布日： 2014-11-26 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一株用于拮抗太子参专化型尖孢镰刀菌的解淀粉芽孢杆菌。该菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）BN-D，已于2014年5月12日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCCNo.9114。该菌株可高效抑制太子参根际土壤的专化型尖孢镰刀菌，在该领域的应用前景广阔。
用于拮抗太子参专化型尖孢镰刀淀粉芽孢杆菌

[发明专利]一种水培液中微生物基因组DNA的提取方法-CN201410270513.4有效
发明人： 方长旬;林文雄;李程勋;李颖哲;林威鹏 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2014-06-18 - 公布日： 2014-10-08 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种水培液中微生物基因组DNA的提取方法，属于生物技术领域。本发明的提取方法先将水培液中的杂质通过定性滤纸进行过滤去除，进一步0.22μm的滤膜收集水体微生物，用液氮/65℃水浴的冻融方法破碎微生物细胞，再加入SDS及溶菌酶裂解细胞，CTAB结合蛋白质及多聚糖、游离核酸，加入酚、氯仿混合物萃取后，萃取液用异丙醇沉淀，最终获得水体微生物基因组DNA。利用该方法提取的核酸纯度较高，且产量较高。试验证明，此法提取的水体微生物DNA，完整性好，纯度较高，进一步纯化后可用于下游的基因组文库构建、qPCR、高通量测序等。
一种水培微生物基因组 dna 提取方法

[发明专利]一株用于拮抗太子参专化型尖孢镰刀菌的枯草芽孢杆菌-CN201410263152.0有效
发明人：赵永坡;林文雄;吴林坤;张志兴;方长旬;初雷霞 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2014-06-14 - 公布日： 2014-09-10 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及一株用于拮抗太子参专化型尖孢镰刀菌的枯草芽孢杆菌。该菌株为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）BS-C，已于2014年5月12日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保藏，保藏编号为CGMCCNo.9145。该拮抗菌的分离可为太子参根腐病的生物防治提供新的生防菌剂。本发明的枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）BS-C,可高效抑制太子参根际土壤的专化型尖孢镰刀菌，在该领域的应用前景广阔。
用于拮抗太子参专化型尖孢镰刀枯草芽孢杆菌

[发明专利]一种土壤微生物cDNA文库的构建方法-CN201110277886.0无效
发明人： 方长旬;林文雄;黄力坤;许铁城;林瑞余 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2011-09-19 - 公布日： 2012-04-18 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明提供了一种土壤微生物cDNA文库的构建方法，本发明的构建方法先将总RNA逆转录成单链的cDNA，单链cDNA的5’端经去磷酸化后与5’端磷酸化修饰的接头1连接，再将5’端连有接头的cDNA进行磷酸化反应，反应后的cDNA的3’端与接头2连接，获得5’、3’端分别连接有接头的cDNA，采用与接头部分序列互补的寡核苷酸作为引物对cDNA进行扩增，从而获得土壤微生物的双链cDNA，将此双链cDNA与克隆载体pMD-18T连接后转化大肠杆菌感受态细胞，最终获得土壤微生物的cDNA文库。本发明构建的土壤微生物cDNA文库库容量较大，可以用来筛选感兴趣的目的基因，以及后续的基因、蛋白互作分析。
一种土壤微生物 cdna 文库构建方法

[发明专利]一种土壤微生物基因组DNA和总RNA的提取方法-CN201010548527.X无效
发明人： 方长旬;林文雄;王清水;余彦;黄力坤;林瑞余 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2010-11-18 - 公布日： 2011-02-16 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供一种有效提取作物根际土壤微生物基因组DNA和总RNA的方法，包括将土壤样品先用硫酸铝去除腐殖质等严重干扰核酸提取的杂质，进一步用玻璃珠破碎土壤微生物细胞，再加入SDS及LiCl溶液裂解细胞、游离核酸，加入酚、氯仿和异戊醇混合物萃取后，萃取液用异丙醇及醋酸钠沉淀，最终获得土壤微生物宏基因组DNA和总RNA。本方法适用于不同地域土壤DNA和总RNA的提取，建立了一种操作流程的简易，制备样品纯度较高的提取技术，能够为土壤宏基因组学研究提供重要基础。
一种土壤微生物基因组 dna rna 提取方法

[发明专利]一种快速、高效提取水稻组织总RNA的方法-CN200910310602.6无效
发明人：王海斌;方长旬;陈荣山;叶陈英;林志华;何海斌;林文雄 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2009-11-28 - 公布日： 2010-11-03 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速、高效提取水稻组织总RNA的方法，其特征在于：按以下步骤进行：称取水稻组织100mg置于陶瓷研钵(未灭菌)中，加入液氮后迅速研磨，研磨时间控制在1min之内；将研磨后的匀浆倒入1.5ml EP管中，后加入1ml的Trizol，充分混匀后15s，加0.2ml氯仿溶液充分混匀15s；12000g离心10min，取上层水相转入新的1.5ml PE管中，加0.5ml异丙醇，于20℃下静置20min；12000g离心10min，倒掉上层清液，加1ml现配的75％的乙醇洗涤沉淀二次，取沉淀物置超净工作台吹干，加DEPC水溶解。本发明水稻组织总RNA的提取方法具有快速、高效、完整性等优点。
一种快速高效提取水稻组织 rna 方法

[发明专利]萜类生物除草剂-CN200810071837.X无效
发明人：何海斌;王海斌;方长旬;曾聪明;林文雄 -专利权人：福建农林大学
申请日： 2008-09-22 - 公布日： 2009-02-11 - 主分类号： A01N37/06 文献下载
摘要：一种萜类生物除草剂为水剂，含有5种含氧萜类化合物，分别为：(－)－香芹醇(C₁₀H₁₆O)、(+)－香芹酮(C₁₀H₁₄O)、(－)－薄荷酮(C₁₀H₁₈O)、(－)－香芹基乙酸(C₁₂H₁₈O₂)和(+)－雪松醇(C₁₅H₂₆O)。本发明所使用的萜类物质均是植物自身代谢过程中分泌的物质，无毒害；采用组合配方，比使用单一物质的抑草效果更好，而且起抑草作用浓度低。本发明的萜类生物除草剂具有高效无毒，对人体和动植物安全等优点。
生物除草剂

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