本发明提供了一种检测叶酸代谢相关基因位点基因型的引物和探针及试剂盒,其针对以下4个叶酸代谢相关基因的8个位点中的至少4个位点:MTHFR基因的677C>T位点、1298A>C位点,MTRR基因的66A>G位点、56A>C位点,MTR基因的186T>R位点、905G>A位点、2756A>G位点,CBS基因的551C>G位点,其中,各引物如SEQ ID NO.1‑16所示,各探针如SEQ ID NO.17‑24所示,每一条探针的两端分别标记有荧光基团和淬灭基团。本发明的引物和探针具有较高的特异性,可以通过荧光熔解曲线法检测上述叶酸代谢相关基因位点的基因型,并以此评估受检者的叶酸代谢能力。