本发明提供了一株能高效利用木糖的类酵母菌株SD685（Pseudozyma sp.SD685），保藏于位于湖北省武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 20221416，保藏日期为2022年9月13日。所述类酵母菌SD685利用诱变结合实验室定向进化技术筛选获得，能够以木糖为碳源发酵生产角鲨烯，解决了农林废弃物综合利用中木糖难利用的问题，同时实现了高附加值产品角鲨烯的生产。此外，所述类酵母菌SD685也能够以葡萄糖为碳源发酵生产角鲨烯，能够实现对木质纤维素原料水解液中木糖和葡萄糖的充分利用。综上可知，本发明所述的类酵母菌SD685解决了木质纤维素综合利用特别是木糖利用的问题，实现了木质纤维素的高值化利用，具有重要的经济效益前景。
本申请提供了一种能够识别、结合多种类型的多糖类物质的碳水化合物结合结构域PcFn3及其制备方法和应用。所述结构域PcFn3的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。所述的结构域PcFn3，可以同时识别结合木聚糖、阿拉伯木聚糖、壳聚糖、纤维素等多种不溶性的多糖底物，能够为酶的融合和固定化提供新的选择，不但有更多可选择的基质，还可能以混合多糖作为基质，具有潜在的巨大应用前景。将结构域PcFn3融合到特定酶的N端或C端，构建相应的工程酶；通过构建融合酶实现相应糖苷水解酶与底物的结合能力的增加进而提升活力。将结构域PcFn3用于构建融合蛋白，不但显著提升目标蛋白的稳定性，还可以实现蛋白质的纯化或重复使用，具有广泛的应用前景。
本申请提供了具备高水解活性和高葡萄糖耐受性的β‑葡萄糖苷酶突变体及其应用。所述突变体具有SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列。所述突变体的比活力均显著高于野生型，葡萄糖耐受性得到的显著的提升。以纤维二糖为底物，在270 mM葡萄糖条件下，突变体酶活性比野生型提高2.81倍和1.5倍。此外，所述突变体酶在以热纤梭菌上清液进行体外糖化时，添加突变体酶的产糖量高于野生型26.01%‑35.86%和12.86%‑20.60%。这说明，与野生型CaBGL相比，本申请所述的β‑葡萄糖苷酶突变体的催化活性和葡萄糖耐受性有了大幅度提高，为整合生物糖化工艺性能的提升提供了新的酶组件和研究基础，具有广泛的应用前景，有望建立新一代的CBS全菌催化剂。
