本发明公开了抗小鼠BP180NC14A的兔杂交瘤单克隆抗体及制备方法、应用和杂交瘤细胞株。所述单克隆抗体对从Q07563‑1中的第499‑573位核苷酸编码的多肽(即SEQ ID No.1所示氨基酸序列)具有特异性。本发明的有益效果体现在提供了一种抗小鼠BP180NC14A的单克隆抗体及其制备和应用,以及产生该单克隆抗体的兔杂交瘤细胞株,为进一步明确BP180在皮肤组织中的病理生理学研究提供了基础,并可用于小鼠大疱性类天疱疮(Bullous Pemphigoid,BP)模型的诱导或小鼠体内抗BP180IgG滴度的检测,具有重要应用前景。