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[发明专利]中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因的真核表达方法-CN201210438435.5无效
发明人：殷文莉;戴建华;周开亚 -专利权人：殷文莉
申请日： 2012-11-06 - 公布日： 2013-03-20 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了了中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因的真核表达方法，其步骤为中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因的真核表达载体的构建和中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因的真核表达；本发明成功表达了MIH蛋白，为进一步了解早熟蟹性腺提早发育的内在机理，了解蟹类蜕皮腺的功能机制并为进一步制定控制河蟹性早熟的技术措施提供理论基础，获得实现生长发育和繁殖的人工调控的基础。
中华绒螯蟹蜕皮抑制激素基因表达方法

[发明专利]一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法-CN201210468427.5有效
发明人：李鹏;严洁;马晓燕;周开亚 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2012-11-19 - 公布日： 2013-02-13 - 主分类号： C07K14/01 文献下载
摘要：本发明涉及一种WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的变复性方法。其内容包括：1）向WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体中加入8M尿素的10mMTris-HCl，pH8.0，剧烈搅动，25℃下用磁力搅拌器不断搅拌3-4小时，使沉淀缓慢溶解；2）4℃，12000rpm离心12min，弃沉淀；3）在所得上清液中加入pH8.0的磷酸盐缓冲液，以pH8.0的磷酸盐缓冲液透析20-22小时，然后用PEG-20000浓缩得可溶性蛋白。利用本发明，WSSV囊膜蛋白原核表达包涵体的复性效率均达到了95%以上，获得了可溶性蛋白。
一种 wssv 膜蛋白表达包涵复性方法

[发明专利]中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1蛋白-CN03158299.0无效
发明人： 周开亚;宋霞;马长艳;郭豫杰 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2003-09-23 - 公布日： 2004-09-08 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，所述的中华绒螯蟹(Eriocheir japonica sinensis)蜕皮抑制激素1(Ers－MIH 1)基因长度为3506bp，包括3个外显子、2个内含子、412bp的5′端上游调控区和917 bp的3′端UTR。根据Ers－MIH 1基因序列推导的多肽由75个氨基酸的成熟肽和35个氨基酸的信号肽组成。该成熟肽具有抑制中华绒螯蟹蜕皮的功能，从而对中华绒螯蟹的生长起重要的调控作用。Ers－MIH 1基因的GenBank检索号为AY310313。本发明利用Ers－MIH 1基因克隆制备融合蛋白，并利用该蛋白免疫动物制备多克隆抗体，同时将该抗体或该基因表达的控制用于解决养殖过程中出现的因蜕皮异常而致个体偏小的问题。
中华绒螯蟹蜕皮抑制激素蛋白

[发明专利]中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹PCR／RFLP分子鉴定方法及试剂盒-CN01127215.5无效
发明人： 周开亚;孙红英;杨光 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2001-09-14 - 公布日： 2003-11-19 - 主分类号： C12Q1/25 文献下载
摘要：本发明涉及水产养殖中河蟹苗种和种蟹鉴定的技术领域，是一种用于鉴别中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹的PCR/RFLP分子鉴定方法及该方法所使用的试剂盒。鉴定方法包括聚合酶链反应、限制性酶切反应和电泳检测。试剂盒中包括一对聚合酶链反应引物、一种DNA限制性内切酶和标准图谱。本发明的优点在于：本发明可解决水产养殖中河蟹苗种和种蟹鉴定的难题，提供一种准确鉴别中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹的分子鉴定试剂盒。
中华绒螯蟹合浦 pcr rflp 分子鉴定方法试剂盒

[发明专利]道地性金银花聚合酶链反应－限制性酶切图谱鉴定方法-CN03113003.8无效
发明人：李萍;王冲之;周开亚 -专利权人：中国药科大学
申请日： 2003-03-20 - 公布日： 2003-08-27 - 主分类号： C07H21/04 文献下载
摘要：本发明属于中药材种质的品质鉴定技术领域，目的是提供一种准确鉴别道地（河南、山东）与非道地（其他产区）产区金银花的聚合酶链反应－限制性酶切图谱分子鉴定方法（PCR－RFLP）。道地产区金银花的特征DNA碱基序列为：5′－GCCCCCCCGCCCCGCCTCCCACAGGGTCGCG－3’；限制性内切酶EcoNI及其同切酶可识别并切割该序列。鉴定过程如下：提取药材DNA：用一对引物进行PCR扩增；用限制性内切酶EcoNI或其同切酶消化PCR产物；琼脂糖凝胶电泳分析结果；通过与道地性金银花PCR─RFLP特征结果相比较，即可判断供试品是否为道地性金银花药材。
道地金银花聚合反应限制性图谱鉴定方法

[发明专利]乌梢蛇、龟板、蛤士蟆油PCR鉴定引物-CN99114133.4无效
发明人：王义权;周开亚;刘中权;杨学干 -专利权人：南京师范大学
申请日： 1999-03-31 - 公布日： 2003-08-06 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明设计了特定的DNA序列，可用于合成鉴别乌梢蛇、龟板、蛤士蟆油真伪的三对高特异性引物，用每一对引物对药材中的DNA进行一次简单的多聚酶链式反应(PCR)，便可准确地鉴定出受试药材的真伪。用这种引物可以制造用于这些药材鉴定的试剂盒，对于各药检部门和从事中药材生产、销售的部门快速准确地鉴定这些药材，搞好质量控制，打击假冒伪劣，净化药材市场将是十分有效的。
乌梢蛇龟板蛤士蟆油 pcr 鉴定引物

[发明专利]中华绒螯蟹卵巢发育相关基因EJ01编码蛋白-CN03112705.3无效
发明人： 周开亚;马长艳 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2003-01-17 - 公布日： 2003-07-23 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，所述的中华绒螯蟹(Eriocheirjaponicasinensis)卵巢发育相关基因EJO1的cDNA全长为876bp，开放阅读框为759bp，编码252个氨基酸，GenBank接受号为AY185917。该基因在中华绒螯蟹的卵巢发育过程中存在表达差异，查阅基因库，该基因为新基因。本发明利用EJO1基因克隆制备融合蛋白，并利用该蛋白免疫动物制备多克隆抗体，同时将该蛋白用于解决养殖过程中雌性中华绒螯蟹的性早熟问题。
中华绒螯蟹卵巢发育相关基因 ej01 编码蛋白