本发明公开了一种基于CRISPR技术的便携式非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒及其制备方法和应用,该试剂盒包括基因编辑探针、反应液、ABTS和过氧化氢;所述基因编辑探针包括与非洲猪瘟核酸特征序列互补的RNA序列crRNA、Cas12a蛋白、引发链;所述反应液包括发夹1、发夹2、氯化血红素;其中crRNA、引发链、发夹1、发夹2分别具有如SEQ ID No.1‑4所示序列。本发明基于CRISPR/Cas12a系统精确识别,通过过氧化氢催化显色即可实现非洲猪瘟病毒的现场快速可视化检测,相较于传统PCR核酸检测法,本发明操作简单,检测结果易读,不依赖专业仪器,检测时间短,具有广阔的应用前景。