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[发明专利]一种乳酸的纯化方法-CN202111231236.2有效
发明人： 单雨瑶;王竞辉;杨付伟;马光;王琛;刘英俊;贾子樊;孙烨 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2021-10-22 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C07C51/42 文献下载
摘要：本发明提供一种乳酸的纯化方法，步骤包括：1)将粗乳酸料液通过离子交换去除离子杂质，再进行浓缩，得到乳酸料液；2)将步骤1)的乳酸料液、固相树脂、蛋白酶溶液混合，进行酶催化反应使乳酸固定在树脂上，反应结束后经过滤，洗涤，得到乳酸‑树脂复合物；3)将步骤2)的乳酸‑树脂复合物加入到切割剂中进行切割反应，再经过滤收集滤液，蒸发去除滤液中的切割液，得到所述纯化后的乳酸。本发明步骤简单，省略了传统乳酸提纯工艺中必需的纳滤、脱色、分子蒸馏等工艺，有效提升了操作效率，降低了分离过程的能耗，且能够得到高纯度的乳酸产品，有效降低乳酸分离流程的成本。
一种乳酸纯化方法

[发明专利]一株生产虾青素的重组酿酒酵母及其应用-CN202010430275.4有效
发明人：杨祖明;王竞辉;赵文娟;单雨瑶;吴计划;贾子樊;黎源 -专利权人：万华化学（四川）有限公司;万华化学集团股份有限公司
申请日： 2020-05-20 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一株生产虾青素的重组酿酒酵母及其应用。本发明公开的重组酿酒酵母组成型表达β‑胡萝卜素酮化酶基因CrtW，诱导型表达β‑胡萝卜素羟化酶基因CrtZ，将中间产物β‑胡萝卜素合成为虾青素，所述β‑胡萝卜素酮化酶基因CrtW和β‑胡萝卜素羟化酶基因CrtZ的拷贝数之比为3:1‑3:2。利用本发明提供的重组酿酒酵母生产虾青素，虾青素的摇瓶发酵产量可达14.70mg/g DCW，同时纯度可达96.69％。
生产虾青素重组酿酒酵母及其应用

[发明专利]一种生产角鲨烯的酿酒酵母的构建方法-CN202210028472.2在审
发明人：王琛;王竞辉;单雨瑶;吴计划 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2022-01-11 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产角鲨烯的酿酒酵母的构建方法。本发明公开的重组酿酒酵母将法尼基焦磷酸合成酶FPPS和角鲨烯合成酶SQS共定位到脂滴表面表达，将HMG1基因替换成截短的tHMG1基因，敲除了OPI3和CHO2基因，并表达了外源PLIN3基因。本发明利用分子定位技术将合成角鲨烯的关键酶FPPS和SQS共定位于酿酒酵母的脂滴表面，拉近了参与连续催化的酶的空间距离，并利用脂滴贮存角鲨烯，减轻了角鲨烯对宿主细胞的毒性，进一步通过调节脂滴的大小和数量，使角鲨烯产量提高了6倍。
一种生产角鲨烯酿酒酵母构建方法

[发明专利]生产NMN的菌株及其构建方法和应用-CN202111342647.9在审
发明人：常红星;杨付伟;马光;单雨瑶;张雅萍;王学兵;王竞辉 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2021-11-12 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术和生物化工领域，提供了一种生产NMN的菌株的构建方法、根据所述方法构建的菌株以及菌株的利用。其中，所述构建方法包括：(1)构建表达以下基因的质粒，所述基因包括：葡萄糖6‑磷酸异构酶基因Pgi、烟酰胺磷酸核糖转移酶基因Nampt和PPP途径基因，其中所述PPP途径基因包括：葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶基因Zwf、6‑磷酸葡萄糖酸内酯酶基因Pgl、6‑磷酸葡糖酸脱氢酶基因Gnd、核糖‑5磷酸异构酶A基因RpiA、核糖‑5磷酸异构酶B基因RpiB、磷酸核糖焦磷酸激酶基因Prs；(2)将质粒转化至大肠杆菌中，筛选基因转化阳性菌株即得。本发明构建的重组大肠杆菌具有高效制备NMN能力，菌株性能优良，NMN制备简单。
生产 nmn 菌株及其构建方法应用

[发明专利]一种生产角鲨烯的酿酒酵母及其构建方法与应用-CN202211698433.X在审
发明人：王琛;王竞辉;单雨瑶;张雅萍;王婕 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2022-12-28 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产角鲨烯的酿酒酵母及其构建方法与应用。在本发明公开的重组酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中，通过构建支架蛋白协同表达酵母内源异戊烯基焦磷酸(IPP)异构酶IDI1、双功能法尼基焦磷酸(FPP)合成酶ERG20和角鲨烯合成酶SQS，并通过引入以EL222‑VP16‑NLS核定位的光敏元件和C120DNA结合序列为基础的光调控表达系统调控酵母内源角鲨烯环氧酶基因ERG1和GAL80的表达。本发明构建的重组酿酒酵母的角鲨烯产量达到20.2g/L。
一种生产角鲨烯酿酒酵母及其构建方法应用

[发明专利]一种印迹脂肪酶及其应用-CN202010220394.7有效
发明人： 单雨瑶;王竞辉;吴计划;杨付伟;张稳;陈长生;王坤;黎源;孔令晓 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2020-03-25 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种印迹脂肪酶及其应用。本发明公开一种制备印迹脂肪酶的方法，包括以高光学纯度L‑乳酸作为印迹模板对脂肪酶进行生物印迹的步骤。本发明将该印迹脂肪酶用于发酵制备L‑乳酸，得到的L‑乳酸光学纯度高，并且不需要对菌株进行改造，操作简便，成本低廉，能够适用于高光学纯度L‑乳酸的工业化生产。
一种印迹脂肪酶及其应用

[发明专利]一种固定化酵母细胞微球及其制备方法与应用-CN201911192271.0有效
发明人： 单雨瑶;王竞辉;张雅萍;杨付伟;王坤;黎源;孔令晓;王庆义;周芸 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2019-11-28 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12N11/096 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化酵母细胞微球及其制备方法与应用。本发明公开的固定化酵母细胞微球为球囊状结构，外壳是包埋材料，内部是包含酵母细胞的芯材，所述包埋材料为甘油醛与聚甘氨酸‑丝氨酸嵌段共聚物交联后的产物。本发明提供的固定化酵母细胞微球包埋效率高、细胞活力损失小，在使用其发酵生产苯乙醇时可以实现发酵产物的快速分离并且该固定化酵母细胞微球可以重复利用，这大大增加了苯乙醇的生产效率，降低了生产成本，在发酵领域具有广泛的应用前景。
一种固定酵母细胞及其制备方法应用

[发明专利]一种利用重相乳酸生产单细胞蛋白的方法-CN202210526116.3在审
发明人： 单雨瑶;王竞辉;杨付伟;马光;张雅萍;王琛;张稳;孙烨 -专利权人：万华化学（四川）有限公司;万华化学集团股份有限公司
申请日： 2022-05-16 - 公布日： 2022-08-30 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用重相乳酸生产单细胞蛋白的方法。本发明以黑乳酸为原料，发酵解脂耶氏酵母生产单细胞蛋白，此外添加裂殖壶菌进行共发酵，补充缺乏的天然ω‑3脂肪酸及其他营养物质，促进了黑乳酸的合理化应用，也有效地补充了饲料蛋白资源方面的不足。该方法针对在聚乳酸单体生产过程中，产生的大量黑乳酸副产物难以处理的问题，提出绿色、环保、高效的解决方案。
一种利用乳酸生产单细胞蛋白方法

[发明专利]一种提高β-苯乙醇单位产量的发酵方法-CN201911097425.8有效
发明人：张雅萍;王竞辉;杨付伟;单雨瑶;孔令晓;王庆义;周芸;黎源 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2019-11-12 - 公布日： 2022-04-22 - 主分类号： C12P7/22 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高β‑苯乙醇单位产量的发酵调控方法，以酵母为生产菌株，苯丙氨酸为底物，通过控制发酵工艺来调控β‑苯乙醇的生产。发酵初期，向发酵罐中添加油酸，萃取发酵罐中苯乙醇，发酵中期，监测发酵罐中苯乙醇、乙醇含量，当发现二者积累到一定浓度时，打开外循环装置，含菌发酵液通过固液分离装置及吸附装置，实现乙醇和/或β‑苯乙醇的吸附，解除两者对菌体的抑制及协同抑制作用。在打开外循环装置的同时，开始使用含蛋白酶的培养基进行补料调控，可有效抑制苯丙氨酸被用于合成蛋白而造成损失，有利于苯乙醇的有效合成。该方法通过原位分离、补料调控等工艺手段，显著提高了β‑苯乙醇的产量，有利于工业化生产。
一种提高乙醇单位产量发酵方法

[发明专利]一种提高雨生红球藻培养物中虾青素双酯含量的方法-CN202210109499.4在审
发明人： 单雨瑶;王竞辉;孙烨;孔令晓;王琛 -专利权人：万华化学（四川）有限公司;万华化学集团股份有限公司
申请日： 2022-01-29 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12P23/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高雨生红球藻培养物中虾青素双酯含量的方法。在培养雨生红球藻的第一阶段在培养基中添加有机酸镁盐，以促进MEP途径以及叶绿体中的电子的传递，从而增强藻类细胞的积累；在培养的第二阶段，加入胍基多肽以及表面活性剂，一方面胍基多肽参与藻类细胞内脂肪酸的代谢，从而促进脂肪酸的大量积累，另一方面，在表面活性剂的作用下能够促进脂肪酶的催化作用，从而促进虾青素双酯的生成。通过上述工艺优化，极大地提高了虾青素双酯在总虾青素产物中的含量，有利于生产高稳定性和抗氧化活性的商业化虾青素。
一种提高雨生红球藻培养物中虾青素双酯含量方法

[发明专利]一种固定化双酶及其制备方法与应用-CN202010333604.3在审
发明人： 单雨瑶;王竞辉;杨付伟;张永振;黎源;孙烨;黄真真 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2020-04-24 - 公布日： 2021-10-26 - 主分类号： C12N11/082 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化双酶及其制备方法与应用。本发明公开的一种固定化双酶包含固定化载体和交联在所述固定化载体上的葡萄糖异构酶和β‑呋喃果糖苷酶。本发明可以实现低聚糖益生元与益生菌的联产，有效提高生产效率，降低成本，可用于低聚果糖工业化生产。
一种固定化双酶及其制备方法应用

[发明专利]一种双水相萃取提纯乳酸的方法-CN202110650746.7在审
发明人： 单雨瑶;王竞辉;刘英俊;朱小瑞;贾子樊;吴计划;孙烨;沈元伟 -专利权人：万华化学（四川）有限公司;万华化学集团股份有限公司
申请日： 2021-06-11 - 公布日： 2021-09-03 - 主分类号： C07C51/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种双水相萃取提纯乳酸的方法。该双水相萃取体系是通过向乳酸发酵液中加入低级醇或乳酸酯与水溶性高分子材料形成的；采用所述双水相萃取体系对乳酸发酵液进行萃取，在静置分层之后，上层得到包含乳酸、低级醇或乳酸酯和水的萃取相，下层得到包含杂质、水溶性高分子材料和水的萃余相，从而实现乳酸与杂质的分离。本发明操作简单，物料用量少，乳酸收率高，没有副反应发生，可用于高纯度乳酸的工业化生产。
一种双水相萃取提纯乳酸方法

[发明专利]一种鼠李糖脂发酵方法-CN201910859981.8在审
发明人：姜西娟;王竞辉;杨付伟;张稳;石森;单雨瑶;张雅萍;刘斌;孔令晓 -专利权人：万华化学集团股份有限公司
申请日： 2019-09-11 - 公布日： 2021-03-12 - 主分类号： C12P19/44 文献下载
摘要：本发明公开了一种鼠李糖脂发酵方法，其包括如下步骤：(A)选用铜绿或恶臭假单胞菌，进行菌种活化；(B)从活化菌种中挑取单菌落接种至种子培养基中培养；(C)将种子液按1‑10％的接种量接种至发酵培养基中培养，其中，根据产物所需的单双鼠李糖脂的比例，发酵培养基选择使用不同的碳源，且发酵培养基包括微量元素，所述微量元素至少包含H3BO4、CuSO4和Na2MoO4。该方法鼠李糖脂对底物的转化率高达90％以上。另外，可通过改变碳源种类和复合碳源配比调控产物中单双鼠李糖脂比例。同时再通过向发酵培养基中添加少量特定组成的微量元素溶液，可有效提高假单胞菌产鼠李糖脂的速率，明显缩短发酵时间25％，在降低发酵成本的也可大幅度减小发酵罐染菌的概率。
一种糖脂发酵方法

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