本发明提供一种检测穿山甲β冠状病毒的引物组、试剂盒和应用，涉及动物病毒检测技术领域。本发明的检测穿山甲β冠状病毒的引物组包括外引物和内引物，各引物的序列如SEQID No.1～SEQ ID No.4下所示。本发明的环介导等温扩增试剂、试剂盒包括上述引物组。本发明的检测方法采用上述引物组、环介导等温扩增试剂或试剂盒对待测样品进行环介导等温扩增。本发明的产品和检测方法具有特异性高、灵敏度高、重复性好等优点。
本发明提供一种用于鉴定鹤鸵目动物性别的引物、性别鉴定方法及试剂盒，涉及生物学检测与人工繁育技术领域。本发明的用于鉴定鹤鸵目动物的引物序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。本发明的性别鉴定方法，包括以下步骤：S1、提取鹤鸵目动物的血液或羽毛的DNA；S2、以步骤S1中提取的DNA为模板，使用上述的引物RASEF‑F1和RASEF‑R1进行PCR扩增，并对PCR产物进行琼脂糖检测；S3、对PCR扩增产物进行测序，根据所得序列的连锁的单核苷酸差异判断鹤目动物的性别。本发明的引物和鉴定方法，能高效、快速、准确地鉴别鹤鸵目动物的性别。
本发明提供一种鹦鹉博尔纳病毒4型的鉴定引物、鉴定方法和试剂盒，涉及生物学检测与疾病诊断领域。本发明的荧光定量PCR鉴定引物序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。本发明的鉴定方法包括以下步骤：S1、提取鹦鹉病料组织的病毒RNA，将病毒RNA反转录成cDNA；S2、以步骤S1中cDNA为模板，使用上述鉴定引物进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增；S3、对扩增曲线进行分析，当ct值≤30并且扩增曲线呈S型时，判定为PaBV‑4型阳性，当ct值＞30时，判定为PaBV‑4型阴性。本发明的引物和鉴定方法，具有灵敏度高，特异性强，重复性好的特点，可用于鹦鹉博尔纳病毒4型的检测，尤其适用于鹦鹉博尔纳4型病毒的早期及隐性感染病毒含量低的检测及鉴定。
本发明公开了一种表达大熊猫犬瘟热病毒H和F基因重组山羊痘病毒的疫苗，疫苗中含有以山羊痘病毒为载体，分别转染表达大熊猫犬瘟热病毒H或F基因的重组转移载体质粒pTK‑H‑Eg或pTK‑F‑Eg而获得的重组山羊痘病毒vpTK‑H‑Eg或vpTK‑F‑Eg，其中重组山羊痘病毒vpTK‑H‑Eg包含如序列表SEQ ID NO.1所示的核酸序列，重组山羊痘病毒vpTK‑F‑Eg包含如序列表SEQ ID NO.2所示的核酸序列。本发明所研制的疫苗具有安全、高效、生产成本低廉等优点，为犬瘟热的防制奠定基础。
