本发明公开了一种免疫磁珠试剂盒及其在检测小反刍兽疫病毒抗原中的用途,属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV N蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对,RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解,且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求,而出现假阴性结果的问题,为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
本发明公开了一种检测小反刍兽疫病毒抗原的免疫磁珠试剂盒及其用途,属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV H蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对,RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解,且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求,而出现假阴性结果的问题,为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
一种用于检测绵羊肺腺瘤病毒的Taqman Real-time RT-PCR试剂盒,所述试剂盒包含One Step RT-PCR buffer、酶混合物、阳性对照、无RNA酶水、序列SEQ ID NO:1和 SEQ ID NO:2的引物及SEQ ID NO:3的探针引物的混合物,所述检测方法包括使用所述试剂盒进行RT-PCR扩增的步骤及评定标准。所述方法能快速、敏感、准确以及低成本地对绵羊肺腺瘤病毒进行检测及定量分析。本发明设计了特异性针对绵羊肺腺瘤病毒的引物及探针,优化并组装成试剂盒。与普通RT-PCR方法相比,本发明省时、省力,成本较低。