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[发明专利]一种鲩肠袋虫的体外培养方法及使用的培养基的制备方法-CN201810350529.4有效
发明人：王桂堂;赵威山;李明;吴山功;邹红;李文祥;熊凡 -专利权人：中国科学院水生生物研究所
申请日： 2018-04-18 - 公布日： 2020-10-27 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种鲩肠袋虫的体外培养方法及使用的培养基的制备方法，属于寄生原生动物体外培养技术领域。本发明培养基的配方为：任氏液100ml、酵母提取物0.5g、䏡蛋白胨1.0g，胎牛血清3～6ml、马血清6～10ml、地衣芽孢杆菌菌液300～500μl、无菌淀粉200～300mg。本发明虫体培养步骤如下：将提取的鲩肠袋虫接种至配制好的培养基中，充氮气后密封，15℃培养48～72h后将虫体转移至另一个新鲜的培养基中，充氮气密封，15℃培养，如此循环往复，使虫体持续增殖。本发明培养基制备方法简单，稳定性好，虫体在培养基中可实现分裂增殖，为鲩肠袋虫的生理学和实验生态学研究奠定了基础。
一种鲩肠袋虫体外培养方法使用培养基制备

[发明专利]一种提高鸡粪便中球虫卵囊回收率的溶液及其制备方法-CN201610064627.2有效
发明人：陈庆忠;安同伟;曹桂敏;孙建 -专利权人：天津赫莱恩特生物科技有限公司
申请日： 2016-01-29 - 公布日： 2020-10-27 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高鸡粪便中球虫卵囊回收率的溶液及其制备方法，该溶液组分及其重量份数比为：聚合硫酸铁5‑30份；聚合氯化铝5‑30份；聚丙烯酰胺0.1‑0.5份；聚乙二醇5‑30份；灭菌水10‑90份。本发明溶液利用絮凝、吸附、分散等作用对粪便中的球虫卵囊进行分离、纯化，相比较饱和盐水漂浮法、蔗糖溶液漂浮法、饱和硫酸镁溶液漂浮法、铬硫酸分离法等方法回收率高、节约时间、还可以减少因反复离心导致的卵囊破裂。
一种提高粪便虫卵回收率溶液及其制备方法

[发明专利]一种控制赤潮藻类生物量的方法-CN202010356306.6在审
发明人：王路;陈建明;林玉雲;吴思仪;魏书蓉 -专利权人：闽江学院;中国大洋矿产资源研究开发协会（中国大洋事务管理局）
申请日： 2020-04-29 - 公布日： 2020-08-14 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种控制赤潮藻类生物量的方法。包括如下步骤，在福建沿岸的不同地区采取表层海水水样，将显微镜下分离到的不同种类原生动物，置于过滤后的灭菌海水中，投放少量灭菌的大米或虾饲料，置于20‑25℃培养箱恒温培养，将不同种类原生动物，分别按1：1500、1：3000、1:4500的细胞个数比例与剧毒卡尔藻进行共培养，选取共培养后培养基中原生动物数量最多的原生动物种类；将选取的原生动物培养；共培养:将受藻类污染的水与上述培养后的原生动物进行共培养即可。本发明所述方法对受赤潮藻类污染的水中的赤潮藻类有明显抑制作用，持续抑藻时间可达72小时以上，未见藻细胞数量的明显反弹。
一种控制赤潮藻类生物量方法

[发明专利]一种从水体中分离单个纤毛虫的方法-CN202010207929.7在审
发明人：柳阳;李文静;姚昕;李丹;聂品 -专利权人：青岛农业大学
申请日： 2020-03-23 - 公布日： 2020-06-23 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明属于微生物处理技术领域，公开了一种从水体中分离单个纤毛虫的方法，分析每滴液体中虫体的数量：每滴液体中有一个虫体的保留；未发现虫体的舍弃；发现多个虫体的，继续将该滴液体稀释至平均每微升一个虫体。重复上述操作至每滴液体中仅一个虫体，利用移液器吸走该液滴，利用显微镜观察该液滴所在的位置确认虫体是否已被取走，确认虫体已吸入到移液器，则根据需要将移液器中的液体转移到指定位置；虫体仍留原处，则向该处加1微升液体，重复上述操作直至吸走虫体。本发明操作简单，不需要操作人员进行训练；可以进行批量操作；适合分离水体中任何一种纤毛虫；适合单一纤毛虫样品或者多种纤毛虫混合样品。
一种水体分离单个纤毛虫方法

[发明专利]一种吞噬微囊藻的棕鞭毛虫的大规模培养方法-CN201610513317.4有效
发明人：杨州;张露;王骏;朱雪霞 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2016-06-30 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种吞噬微囊藻的棕鞭毛虫的大规模培养方法。该方法通过半连续添加外源有机碳，给予光照提供混合营养鞭毛虫种群生长，能够在较短时间内获得大量的该棕鞭毛虫。本发明技术优点在于通过混合营养培养的方法，短时间内收获大量的棕鞭毛虫，提供了吞噬微囊藻的棕鞭毛虫大规模培养的方法，获得的大量棕鞭毛虫可用于控藻，另外，这种依据捕食者摄食行为控藻，避免了化学方法对水体的二次污染，同时也可以将水体里藻毒素降解为无毒物质，从而起到控藻和净化水体的作用，具有重大的实践意义。
一种吞噬微囊藻鞭毛虫大规模培养方法

[发明专利]一种鸡源火鸡组织滴虫传代致弱株、其制备方法及用途-CN201910962687.X在审
发明人：许金俊;孔令明;戎杰;陈乔光;王子静;禚振男;郭平;曲昌宝;刘丹丹;侯照峰;陶建平 -专利权人：扬州大学
申请日： 2019-10-11 - 公布日： 2019-12-27 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域一种鸡源火鸡组织滴虫传代致弱株、其制备方法及用途，提供的鸡源火鸡组织滴虫传代人工致弱株A162具有良好的安全性和免疫原性，其由分离自鸡群的虫株经传代致弱、冻存再经虫株复苏，获得的候选活疫苗成本低，使用方便，使用后无药物残留，不产生耐药性，不会对环境造成污染，免疫原性好，使用安全，能有效抵抗105个强毒虫体的感染。相比火鸡来源虫株所制备的疫苗，该疫苗对鸡群的组织滴虫病的预防更为科学和可靠，有望成为药物控制鸡群组织滴虫病的替代手段，从而有效克服该病防治目前面临的巨大瓶颈和困境。
传代火鸡组织滴虫免疫原性制备疫苗生物技术领域无药物残留药物控制耐药性毒虫活疫苗火鸡冻存鸡源种鸡复苏瓶颈抵抗感染防治替代污染预防

[实用新型]一种可固定收集卡片的DNA采集装置-CN201920532285.1有效
发明人：吴瑞芳;廖志宏 -专利权人：深圳市廖氏原生物医学科技有限公司
申请日： 2019-04-18 - 公布日： 2019-12-13 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本实用新型提供一种可固定收集卡片的DNA采集装置，包括杯体以及盖设设置于所述杯体上部开口部位的杯盖体；所述杯体呈倒圆锥体状，且该杯体底部呈圆弧形过渡；所述杯体内侧上部环状设置有用于对采集有标本的卡片进行位置限定的限位卡环；该杯盖体朝下侧延伸形成用于卡入杯体上部开口中的卡合柱；还包括设置于所述卡合柱一侧、便于将杯盖体与杯体分离的扣耳，实际应用过程中，可以较好的对采集了标本的卡片进行固定，防止提取分离液体里DNA/核酸的过程中将卡片带出，本设计结构设计合理，相比于传统结构可以有效的提高提取效率，且制作成本低。
杯体杯盖体杯体上部卡片采集本实用新型倒圆锥体状圆弧形过渡传统结构环状设置开口部位设计结构提取分离提取效率位置限定限位卡环应用过程卡合柱卡片带可固定标本核酸盖设合柱卡入扣耳开口延伸制作

[发明专利]车轮虫活体保存方法-CN201710339485.0有效
发明人：张立强;艾桃山;喻运珍;邓平;周伟东;郑瑞珠;张生元;丁桂珍;魏朝辉;罗杨志;李勤 -专利权人：武汉市农业科学院
申请日： 2017-05-15 - 公布日： 2019-09-03 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种车轮虫活体保存方法，将车轮虫及水螅按数量比5～20:1共同培养。所述共同培养具体包括以下步骤：S1：将车轮虫与水螅按数量比5～20:1投入盛水的透光保存容器，并用透气材料将所述保存容器封口，并保证每一只水螅对应3‑5cm²的水面；S2：每隔2天，投水蚤至保存容器，水蚤的量设置为：每只水螅对应4只水蚤；S3：对车轮虫及水螅进行每24h计数一次并维持数量比5～20:1。本发明具有以下优点：操作简单，可重复性强，车轮虫保存时间长，且车轮虫的保存量大，本发明是一种可广泛应用于车轮虫的试验研究的保存方法。
车轮活体保存方法

[发明专利]一种无外源菌DNA污染的球虫卵囊的制备方法-CN201510642944.3有效
发明人：龚振兴;蔡建平;刘保红;殷昊;李法财;马雪婷 -专利权人：中国农业科学院兰州兽医研究所
申请日： 2015-09-30 - 公布日： 2019-08-13 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种无外源菌DNA污染的球虫卵囊的制备方法，属于生物技术领域。本发明通过使用无微生物DNA污染的二次蒸馏水并配制所需试剂，采用1.2M蔗糖漂浮沉淀法对卵囊进行纯化，纯化后的卵囊经15％次氯酸钠溶液和细胞裂解液双重处理，充分裂解残留的细菌等杂质，再通过TE和二次蒸馏水反复漂洗去除粘附于卵囊壁的外源菌DNA。研究表明，经本发明方法处理后的卵囊纯度高，所抽提的基因组DNA经PCR检测无外源菌DNA污染，且整个过程操作简单，成本低，并对卵囊不产生任何影响。本发明的提出对球虫卵囊高纯度基因组DNA提取、基因克隆、全基因组(重)测序，以及表观遗传调控的研究具有重要意义。
一种无外源菌 dna 污染虫卵制备方法

[发明专利]强化YvbW表达的地衣芽胞杆菌在杆菌肽生产中的应用-CN201810246295.9有效
发明人：陈守文;朱江;蔡冬波;朱杉;刘紫薇;李俊辉;段茂华;楼丽君;陈晓斌 -专利权人：绿康生化股份有限公司
申请日： 2018-03-23 - 公布日： 2019-06-14 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明提供一种强化YvbW表达的地衣芽胞杆菌在杆菌肽生产中的应用，本发明通过基因工程的方法通过在地衣芽孢杆菌的基因组内插入氨基酸通透酶YvbW基因，得到地衣芽孢杆菌DW2‑yvbW，该菌株在杆菌肽发酵过程中发酵液中杆菌肽的产量提高了13％以上。
菌株地衣芽胞杆菌地衣芽孢杆菌杆菌肽制备氨基酸通透酶发酵过程基因工程发酵液基因组应用基因

[发明专利]一种多子小瓜虫的传代培养方法-CN201910167238.6在审
发明人：顾泽茂;杨浩;王哲 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2019-03-06 - 公布日： 2019-06-11 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种多子小瓜虫的传代培养方法，属于原代细胞培养技术领域。本发明简化了分离病鱼体表滋养体的方法，提高获得样本的效率；采用无菌曝气水和控温的方法优化了多子小瓜虫的培养条件，使得滋养体能在优良的环境中存活并在更短的时间内产生更多的掠食体；将掠食体和健康金鱼在高密度的条件下进行感染，增加了感染的几率以及成功率。利用本发明的培养方法对采集到的多子小瓜虫进行传代培养，可以稳定的将虫株保存10代以上，最长可以保存98天，随时可为实验提供大量的各生活史阶段的寄生虫活体样本，方便多子小瓜虫研究的开展。
多子小瓜虫传代培养原代细胞培养活体样本培养条件寄生虫滋养体保存感染病鱼控温曝气无菌金鱼成功率样本滋养存活体能采集优化健康研究

[发明专利]一种家蚕微孢子虫孢原质的分离富集方法-CN201811627351.X在审
发明人：李田;何强;周泽扬 -专利权人：西南大学
申请日： 2018-12-28 - 公布日： 2019-05-03 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种家蚕微孢子虫孢原质的分离富集方法，具体步骤如下：(1)利用0.1M KOH水溶液处理家蚕微孢子虫孢子，离心，弃上清，加入TC100昆虫培养基悬起孢子沉淀，孵育，得到培养基悬起的孢子样品；(2)吸取步骤(1)的孢子样品，进行细胞核染色，观察极管中弹出的孢原质的情况，统计孢子的发芽率；(3)当孢子发芽率达到60％时，将发芽后的孢子样品加入到30％和60％两个密度梯度的percoll溶液中，进行密度梯度离心分离孢原质；(4)收集上层30％密度层的percoll溶液，清洗和离心即可。本发明操作方便，同时可以高效分离并富集孢原质，并对深入研究微孢子虫的侵染机制以及生活史具有深远意义。
原质家蚕微孢子虫孢子样品孢子分离富集密度梯度离心发芽率昆虫培养基水溶液处理细胞核染色孢子发芽率高效分离密度梯度深远意义微孢子虫培养基密度层孵育富集极管侵染沉淀发芽清洗上层观察统计研究

[发明专利]用于海藻宿主细胞的CRISPR-Cas系统-CN201780055558.1在审
发明人： J·C·利普梅尔;Y·贝茨;J·A·柔布斯;R·沃瓦尔 -专利权人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司
申请日： 2017-07-13 - 公布日： 2019-04-26 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明涉及分子生物学和细胞生物学领域。更具体地，本发明涉及用于网粘菌纲(Labyrinthulomycete)宿主细胞的CRISPR‑Cas系统。
宿主细胞细胞生物学领域分子生物学海藻菌纲

[发明专利]一种鸡球虫卵囊的培养和保存液及其应用-CN201811365560.1在审
发明人：龚振兴;蔡建平;魏红梅;常芳;刘百林;殷宏 -专利权人：中农威特生物科技股份有限公司
申请日： 2018-11-16 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种鸡球虫卵囊的培养和保存液及其应用，属于兽医寄生虫学领域。本发明采用山梨酸钾水溶液做为培养和保存液。试验证实，其对卵囊孢子化率不产生影响，并具有明显抑菌作用，且能显著提高在4℃下长时间保存的鸡球虫卵囊活力。结果表明，1~3%的山梨酸钾水溶液可替代重铬酸钾溶液作为鸡球虫卵囊的培养液和保存液。
保存液山梨酸钾水溶液鸡球虫卵囊球虫卵囊种鸡培养液兽医寄生虫学重铬酸钾溶液卵囊孢子化时间保存抑菌作用应用试验替代

[发明专利]一种蝗虫微孢子虫及其悬浮培养方法和应用-CN201510890754.3有效
发明人：陈弘飞;李锦荣;其他发明人请求不公开姓名 -专利权人：南京华得福生物科技有限公司
申请日： 2015-12-07 - 公布日： 2018-12-07 - 主分类号： C12N1/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种蝗虫微孢子虫及其悬浮培养方法和应用。其中，所述的蝗虫微孢子虫株，为从亚洲飞蝗(Locusta migratoria L.)中分离，经蝗虫体内传至10代，体外培养传至10代后获得，保藏号为CGMCC No.11170。进一步的，本发明还提出了一种用于体外培养蝗虫微孢子虫的培养基及悬浮培养方法，所述培养基以昆虫源性、水溶性、去乙酰化的几丁质为细胞外基质，聚乙烯吡咯烷酮作为粘性补充剂，同时添加了蛋白提取物，采用本发明公开的培养基、利用生物反应器进行微载体悬浮扩增培养，能够使得经微载体悬浮培养的微孢子虫数达到起始培养的60倍。本发明提供了一种体外大量培养蝗虫微孢子虫的方法，为蝗虫微孢子虫作为生物杀虫剂的大规模使用提供了技术支持。
一种蝗虫孢子及其悬浮培养方法应用