本发明公开了一种TNF‑α纳米抗体及其在制备溃疡性结肠炎药物中的应用。所述的TNF‑α纳米抗体具有如下氨基酸序列:(1)由SEQ ID No.1或2或3所示的氨基酸序列组成的蛋白质;或(2)与序列SEQ ID No.1或2或3限定的氨基酸序列同源性在80%至100%编码相同功能蛋白质的氨基酸序列;或(3)SEQ ID No.1或2或3所示的氨基酸序列经增加、缺失或替换一个或多个氨基酸具有同等活性的由(1)衍生的蛋白。本发明所述的TNF‑α纳米抗体在大肠杆菌中的表达和分离纯化,及其在制备溃疡性结肠炎药物中的应用。