[发明专利]一种新的多肽——人糖水解酶11和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽--人糖水解酶11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

糖类在生物界中分布极广，含量较多的一类物质，几乎所有的动物、植物、微生物体内都含有它。糖类的主要生物学作用是通过氧化而放出大量的能量，以满足生命活动的需要。淀粉、糖原是重要的生物能源，它也能转化为生命必需的其他物质，如蛋白质和脂类物质等。糖类也是细胞膜的重要组成部分。糖类与蛋白结合形成的糖蛋白包括许多酶、大分子蛋白激素、血浆蛋白、抗体、补体因子、血型物质和黏液组分以及许多膜蛋白。糖类还在许多重要的信号通路中起作用。因此，糖类在广泛的生物学过程中都起到核心的重要作用。糖类的代谢在维持机体正常运转中起重要作用。

水解糖类的酶，糖水解酶，可以将多糖水解为寡糖，进而可将寡糖水解为单糖。糖水解酶可以依据底物特异性、水解的方式(内切或外切)、水解的立体化学机制以及核酸序列的不同分为几类。现在依据核酸序列的不同已经发现了60种水解酶家族。其中水解酶家族Ⅰ包括：许多种细菌中的β-葡萄糖酶；两种植物(苜蓿)中的β-葡萄糖酶；从原始细菌中发现的两种不同的β-葡萄糖酶；许多细菌中发现的6-磷酸-β-半乳糖苷酶；从大肠杆菌中发现的6-磷酸-β-葡萄糖酶；植物芥子酶；哺乳动物乳糖酶-根皮苷-水解酶(LPH)，在小肠中，此酶水解乳糖。LPH是包括1900个残基的大分子量蛋白，包括4个450残基的重复结构。

其特征保守结构是：[LIVMFSTC]-[LIVFYS]-[LIV]-[LIVMST]-E-N-G-[LIVMFAR]-[CSAGN]，其中E是催化活性位点；以及：F-x-[FYWM]-[GSTA]-x-[GSTA]-x-[GSTA](2)-[FYNH]-[NQ]-x-E-x-[GSTA]，糖水解酶基因的突变会导致许多遗传疾病，例如溶酶体储存失常等。而对糖水解酶的特异性的抑制剂也显示了治疗方面的潜力。本发明的多肽被推断鉴定为人糖水解酶11。

由于如上所述人糖水解酶11蛋白在机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人糖水解酶11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人糖水解酶11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽--人糖水解酶11以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人糖水解酶11的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人糖水解酶11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人糖水解酶11的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽--人糖水解酶11的抗体。本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽--人糖水解酶11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人糖水解酶11异常相关的疾病的方法。本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO:1中1891-2184位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2518位的序列。

本发明另外涉及一种含有本发明多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本发明多肽的方法。

本发明还涉及一种能与本发明多肽特异性结合的抗体。

本发明还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人糖水解酶11蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本发明的多肽。本发明还涉及用该方法获得的化合物。