[发明专利]一种枯草芽孢杆菌活菌制剂及其制做方法

说明书

本发明涉及一种微生物制剂及其制做方法。

我国50年代开始生产治疗肠道消化不良及肠炎的肠球菌制剂乳酶生和酵母片等。到八十年代由于抗生素大量广泛应用，导致耐药性菌株的大量出现及菌群失调性腹泻增多，此时临床医生更关注生态防治。多年来应用人体的非芽孢菌如乳酸、双歧菌、肠球菌等做成的制剂虽有一定疗效，但由于该类制剂中的细菌成活率低、保存期短、疗效也不令人满意，一直困绕着生物药品业的发展。这样寻找安全、有效、保存期长的微生物菌株及其微生物药品，已成为各科学家探求的方向。

本发明的目的是提供一种枯草芽孢杆菌活菌制剂及其制做方法，该制剂对人体安全、有效、不易产生耐药性，无异味、保存期长的微生态制剂，用于治疗因各种因素引起的消化不良、急、慢性肠炎及菌群失调性腹泻。尤其是对出血型大肠杆菌感染性肠炎的治疗更为有效。其制做方法简单、成本低、易于实施。

为了实现上述目的，本发明采用下述技术方案：这种枯草芽孢杆菌活菌制剂的组份的重量比为：

枯草芽孢杆菌BS-3菌株的原菌粉为1.5-2.5份(重量份数)

赋形剂为96-100份(重量份数)，

其中枯草芽孢杆菌BS-3菌株的原菌粉中的活菌数为≥200亿个活菌/克。

所述赋形剂为乳糖和可溶性淀粉，其中乳糖与可溶性淀粉的重量比为：

乳糖          9-11份(重量份数)

可溶性淀粉    87-89份(重量份数)

还有，所述原菌粉是由湿菌体和无水碳酸钙按1∶3重量比混匀干燥制成的。

该枯草芽孢杆菌活菌制剂可以是干粉制剂或胶囊制剂，或其它形式的制剂。其中在干粉制剂中，一般采用0.25克/袋或50克/袋，枯草芽孢杆菌活菌数为≥1.0×10⁸个活菌/克。而在胶囊制剂中，一般采用0.25克/粒，枯草芽孢杆菌活菌数为≥1.0×10⁸活菌/克。

本发明的枯草芽孢杆菌活菌制剂是经过下述方法制成的：

(1)生产菌种活化检定

无菌启开枯草芽孢杆菌BS-3的冻干菌种，接种营养肉汤培养液中管内，在20℃-45℃条件下培养18-24小时，然后划线转种于营养平板，在20℃-45℃条件下培养18-24小时，挑典型菌落，进行形态学与特性检定，

(2)种子液的制备

将上述检定合格的纯培养物，接种于营养肉汤培养瓶内，在20℃-45℃条件下培养18-24小时，进行纯菌及菌形特征检查，

(3)配制培养基

将牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、氯化钠加入蒸馏水中，上述各组份在蒸馏水中按1000毫升的溶液所含的重量(g)的组份配制：牛肉膏4-6克/1000毫升，蛋白胨9-11克/1000毫升，葡萄糖9-11克/1000毫升、氯化钠4-6克/1000毫升，将上述混合物加热溶解后，调PH为7.0-7.2，15磅压力下灭菌20-30分钟，即制成培养菌液，

(4)接种培养

将上述检定合格的种子液按1-3％的体积比例接种至上述培养液中，在20℃-45℃条件下培养48-72小时，检查芽孢形成的比率，并要求生孢率达90％以上，

(5)收集菌体

将上述培养到期的培养物，经纯菌试验确认无杂菌污染后，离心弃上清，然后收集湿菌体，

(6)制备原菌粉

用灭菌的无水碳酸钙与上述湿菌体混合搅拌成湿菌粉，之后在70℃-80℃条件下干燥，研磨成干粉即原菌粉，所述原菌粉的活菌数控制为≥200亿个活菌/克，

(7)拌粉

将上述原菌粉按上述重量比例加入灭菌过筛的赋形剂，充分搅匀后，即制成枯草芽孢杆菌活菌制剂，该制剂的活菌数为≥1亿个活菌/克。

在该制做方法中，所述的赋形剂为乳糖和可溶性淀粉，其中乳糖与可溶性淀粉在该活菌制剂中的重量份数比为：

乳糖          9-11份(重量份数)

可溶性淀粉    87-89份(重量份数)

还有，所述湿菌体和无水碳酸钙按1∶3重量比混匀。

在该制做方法中，所述枯草芽孢杆菌活菌制剂采用袋装，即制成枯草芽孢杆菌活菌干粉制剂。

在该制做方法中，述枯草芽孢杆菌活菌制剂置于胶囊罐装机内罐装，压板、包装，即制成枯草芽孢杆菌活菌胶囊制剂。