[发明专利]乙肝疫苗

说明书

本发明涉及新的疫苗制剂、制备该制剂的方法以及其在治疗中的用途。本发明特别涉及新的用于治疗肝炎感染的制剂以及包含有乙肝疫苗成分的组合疫苗制剂。

由A、B、C、D及E型肝炎病毒引起的病毒性肝炎是非常常见的病毒疾病。特别是由B和C型病毒引起的肝炎还是造成很多肝癌病例的主要原因。因此极需研制出有效的疫苗，但是此项工作虽然已取得显著的成就，其仍然是一项正在进行的事业。在“柳叶刀”(Lancet)，1990年5月12日，第1142页(A.L.W.F.Eddleston教授)中可查得对当今肝炎疫苗的评论(包括很多主要的参考文献)。也可以参见“病毒性肝炎和肝病”(Viral Hepatitis and LiverDisease)(Vyas，B.N.，Dienstag，J.L.，及Hoofnagle，J.H.，eds，Grune和Stratton，Inc.(1984))以及“病毒性肝炎和肝病”(Viral Hepatitis and Liver Disease)(“1990年国际专题讨论会会报”(Proceedings of the 1990 International Symposium)，edsF.B.Hollinger，S.M.Lemon及H.Margolis，由Williams and Wilkins出版)。

如文中所用到的，用“乙肝抗原”一词来指任何来自乙肝病毒的抗原物质，这些抗原物质可被用来诱导人体对该病毒的免疫。

乙肝病毒(HBV)感染是个有普遍性的难题，但是目前可以购买到可用于大量免疫接种的疫苗，例如通过遗传工程技术获得的′Engerix-B′产品(SmithKline Beecham plc)。

有很多资料报道了乙肝表面抗原(HBsAg)的制备。例如，参见Harford等人[“发育生物学标准54”(Develop.Biol.Standard)，第125页(1983)]、Gregg等人[“生物技术”(Biotechnology)，5，第479页(1987)]、EP-A-0226846、EP-A-0299108以及本文中的参考文献。

如文中所用到的，“乙肝表面抗原”或“HBsAg”一词包括任何表现HBV表面抗原的抗原性的HBsAg抗原或其片段。可以理解的是，除开HBsAgS抗原的226个氨基酸序列(参见Tiollais等人，“自然”(Nature)，317，489(1985)及文中的参考资料)之外，如果有必要，文中所述的HBsAg可以包括有如上述参考文献及EP-A-0278940中所述的前-S序列的全部或部分。特别述参考文献及EP-A-0278940中所述的前-S序列的全部或部分。特别是，HBsAg可以包含有一个多肽，该多肽具有一段含有第12-52残基的氨基酸序列，接着是第133-145残基，再接着是与ad血清型的乙肝病毒上的可读框有关的HBsAg的L-蛋白的第175-400残基。(将该多肽称作L^*，参见EP0414374)。本发明范围内的HBsAg也可以包括如EP0198474(Endotronics)所述的前S1-前S2-S多肽或其诸如EP 034 578(McCormick和Jones)中所述的那些多肽之类的类似物。文中所述的HBsAg也指一些突变体，例如，WO 91/14703或欧洲专利申请公开号0511855A1中所述的“逃逸”突变体，尤其是其中145位的氨基酸取代是由甘氨酸至精氨酸的HBsAg。

通常，HBsAg会处于颗粒状态。例如这些颗粒可以只包含有S蛋白，或者这些颗粒可以是组合颗粒，例如(L^*，S)，其中L^*是如以上定义的，且S指HBsAg的S-蛋白。所述颗粒最好是处于某种状态，其中该颗粒就是以这种状态在酵母中表达。

虽然由实验获得的和从市场上购得的肝炎疫苗，例如Engerix-B，可产生很好的结果，但已承认的事实是，最适宜的疫苗不仅应激发中和的抗体，而且应尽可能有效地激发通过T-细胞介导的细胞免疫。国际专利申请WO93/19780中公开了一些组合疫苗，该组合疫苗是由基于一种乙肝表面抗原的乙肝成分、氢氧化铝和3-去-O-酰单磷酰基脂类A组成。但未建议一种含有磷酸铝的制剂。

出人意料之外的是，本发明提供了一种制剂，该制剂的有效性比WO93/19780中所述的那些制剂的有效性高，可达其4倍。

因此，本发明提供了一种疫苗，其含有乙肝抗原，连同有3-去-O-酰单磷酰基脂类A(文中缩写为MPL)以及磷酸铝。