[发明专利]癌症尿检试剂及判定标准色板

说明书

本发明涉及一种癌症普查筛检及病情追踪的尿检试剂，它包括由Hg⁺、Hg²⁺及硒(Se)组成的酸性溶液，及应用时用于判定的标准色板。它属于医学技术领域，也属于生物化学技术领域，其国际专利分类号分别为A61、C12。

动物实验和人群研究表明，肿瘤的发生是长时间、分阶段的，从正常细胞发展到临床可诊断出癌症，一般要经过无症状的临床前癌期。因此，就需要应用快速、简便的筛检试验，将表观健康而处于临床前癌期的人，同那些可能无癌的人区分开来。筛检不是诊断，对筛检试验阳性或可疑阳性者，需进一步明确诊断，以便及时治疗，从而提高治愈率，减少癌症治疗难度或癌症死亡。

筛检试验中以生物学标志物为指标的研究尚处于实验室阶段，主要原因是目前发现的一些标志物例如癌基因、肿瘤抗原等作为筛查指标缺乏必要的敏感性及特异性，且操作复杂、专业化程度要求高等原因而无法广泛应用。

尿中肿瘤标志物的研究已有报道，如尿中多胺的检测，含巯基化合物的检测，某些氨基酸代谢产物的检测等。叶应妩等在《临床实验诊断学》(1989，人民卫生出版社，1594页，405～406页)提出，癌症患者尿中酪氨酸代谢产物对羟基苯丙酮酸含量可能升高，可用米伦试剂来测定，但实际应用中存在许多不易克服的缺陷，原因是尿中无机盐浓度高，可使米伦试剂内汞沉淀而失去效用。

美国专利说明书US-5066601针对米伦试剂不能直接测定尿中酪氨酸衍生物，提出了一种用Hg²⁺首先结合尿中无机盐，防止其干扰整个反应过程的方法，用于肿瘤的诊断，但因其试剂的配制比例不当，致使其应用效果不佳。

欧洲专利0341803A、中国专利CN1096374A(1994年12月14日公开)则提出了一些改进方法，但由于其配比组成仍存在一些问题而未能得到应用。

对于实际应用中出现的各种颜色反应如何判定，上述专利中均未给出明确解决办法，因而更加限制了这些试剂的应用推广。

本发明的目的是提供一种供癌症筛检用尿检试剂及判定标准比色板，它应可以方便地从尿中检测出被测者是否可能患有癌症，也可用于检测病人有无复发、转移，评价治疗效果等。

为实现本发明目的所采取的技术措施：利用Hg⁺，Hg²⁺和Se的酸性溶液，测定尿中酪氨酸的某些代谢物及含巯基化合物，后者在尿中的排泄量随着癌症的有无及病情变化而变化，并将实际获得的试剂与尿标本反应的状况拍成照片，作为比色标准色板。

本尿检试剂的组成中，Hg⁺与上述代谢物的苯酚基发生颜色反应，Hg²⁺除去尿中无机盐并平衡体系内反应，Se参与时，与尿中含巯基化合物产生颜色反应，其中：Hg⁺、Hg²⁺与Se的比例为：1∶0.1-3.0∶0.001-0.05。

标准比色板制作：用配制好的尿检试剂与健康人3-5名、各类已确诊的癌症患者10-20名的尿样反应，观察所产生沉淀，各类选择一个沉淀量及其颜色特征明显的样本拍制成照片或绘制成色板，称为判定标准比色板。

本发明的使用方法：取尿液3ml，滴加本发明试剂0.5ml，立即有沉淀生成，振荡放置2分钟后，与本发明中的判定标准色板对比，浅于标准色板颜色1号为阴性，深于标准色板颜色2号为阳性。8-9号为黄疸干扰。

与已有技术相比较，本发明的效果表现在下述几个方面：

1.利用本试剂用于癌症普查筛检，及癌症病情、治疗效果监测，简便易行，操作性强，检测无创伤，无痛苦。

2.应用本试剂对112例新入院、未作任何治疗的各类癌症病人进行检测，检查出93例阳性，检测结果与最后病理学诊断及其它影象学诊断对比，准确率平均可为83％。

3.应用本试剂对195便工人作普查，2例弱阳性，2例强阳性，阳性率为2.05％。其中2例强阳性被最终确诊患有早期癌症(一例胃癌，一例乳癌)。

4.应用本试剂对50例健康献血者进行检测，1例阳性，阳性率2.0％。

5.根据上述结果可计算出：

敏感性＝阳性检出数/被检癌症病人总数＝83％；

特异性＝阴性检出数/被检人群总数＝97.9％；

阳性预示值＝真阳性数/阳性检出总数＝82.6％；

阴性预示值＝真阴性数/阴性检出总数＝92.7％。

附图说明：

图1是癌检的标准色板。

图中颜色1号表示阴性；颜色2-7号表示阳性；颜色8-9表示黄疸干扰。