[其他]免疫复合物的检测方法和步骤

说明书

在抗感染物方面，免疫系统代表着机体的主要防御机制。脊椎动物的免疫系统具有两种功能性的分化：体液免疫和细胞免疫。体液免疫是指免疫系统中的循环成分，它们由细胞产生或分泌，并且存在于免疫血清之中。细胞免疫是指不同类型白细胞对外来靶标物质的直接作用。这两种相互关联的系统之协同作用担负起机体对千变万化的感染性疾病的抵御。

在通常情况下，感染物对机体的侵染刺激了细胞之应答反应，这些细胞产生体液免疫的有效成分。特别是B淋巴细胞合成特殊的蛋白质、即抗体，抗体选择性地结合在外来感染物的一些作用点上，这种结合完成以后，机体就通过细胞免疫或体液免疫;甚至直接由抗体分子本身所起的失活作用使感染物遭到破坏。

正常情况下，抗体分子不对宿主本身或者说“自身”物进行作用。然而，在某些个体中，免疫系统错误地将自身成分当成外来侵染物。一旦这种情况发生，机体就会以对待外来物同样的方式向机体自身发起免疫攻击。这种自身免疫反应的后果是可悲的。这类疾病的症状包括不能利用糖（Ⅰ-型糖尿病）、关节损伤（类风湿性关节炎）、肾脏损伤（内吸性红斑狼疮、肾小球性肾炎及类似疾病）和血管系统的损伤（脉管炎）。自身免疫系统紊乱，导致患者经受巨大的痛苦，并有相当高的死亡率。

自身免疫病持续伴有高浓度的（Blood-borne）自身免疫复合物在血液中出现。许多由自身免疫病所形成的损害可以追溯至细胞免疫系统的作用，不管在机体那个部位出现自身免疫复合物，均由该系统负责清除。过去的事实证明对这类疾病的控制是困难的，部分是由于检测方法方面的原因，其不能妥当地鉴别开正常人和患病者之间所反映出来的免疫复合物的水平差。

在研究准确、快速和经济的对免疫复合物检测方法方面，已经尝试了许多不同的技术手段，以此来为包括自身免疫病在内的;许多以产生免疫复合物为特征的疾病诊治服务。虽然常有天才的发明家出现，但还没有被认为是完好的方法。以下是先有技术方法中所受限制的例子。

首先，鳐鱼（Raji）细胞测定法，它取决于细胞膜表面上的免疫复合物受体的存在，而这些受体仅仅出现于细胞培养过程中细胞生长的某些特定时期。

其次，作用于免疫复合物的补体部分或抗体，常用于进行放射免疫测定或酶联免疫吸附测定。不幸的是，用于起固定作用的补体和抗体都是不稳定蛋白。这种不稳定性导致敏感性、专一性和再现性的丧失。因此那些依赖于补体固定作用的测定方法，无论测定中的固定作用是直接的还是通过抗体吸附介导的，都由于这种不稳定性，而使之不具备临床检验的可依赖性。

另外，免疫球蛋白的种类和大小限制了补体依赖测定法（Complement-based assays）的使用。鳐鱼细胞测定法和补体依赖测定法一般均不能将免疫复合物中的抗体种类和亚种详细测出来;只限于这样几种：IgM、IgG₁，IgG₂，和IgG₃。鳐鱼细胞测定和其它的补体依赖测定法一般仅能检测出分子量大于：1，000，000道尔顿的复合物。正是这两条主要限制了鳐鱼细胞试验和补体试验。

最后一点，目前，使用如聚乙二醇、葡聚糖、金黄葡萄球菌（Staph    ylocuccus    aureas）蛋白A等物质进行沉淀的液体物理化学技术效果不佳，原因是在处理那些微小的不断出现的絮状物沉淀物方面仍有一些无法克服的困难。还有，与免疫无关的免疫球蛋白同沉淀物的偶然连结会更进一步降低这类实验的结果。这些困难大大地妨碍了这类免疫复合物测量方法的应用。克服这些限制需作大量的实验，因此而提高了对患者的收费。结果是，许多实验没有按要求进行，也没有及时地、严格地监视患者疾病医治方面取得的进展。开发出一种能将免疫复合物粘附在一个固体支持物上的，既经济又有效的方法，对解决这些问题是重要的。

本发明的目的在于提供能够选择性地吸附或附着免疫复合物的组合物方法及材料，从而可有效地用于检测众多类或亚类的免疫复合物。本发明的目的之二即在于克服如前所述的将免疫复合物吸附在固相表面上用于检测，从血清中去除免疫复合物等所有方法中的，在选择性、稳定性和处理等方面的不足之处。本发明的目的之三在于提供新颖的、高度适用的和易于掌握的应用手段，对经过附着作用而附着在支持物上的复合物之成分进行检测;并且进而将其用于临床对免疫复合物进行检测、分离和浓缩，或用于任何其它与人类或脊椎动物医学有关的目的。

本发明所包括的是对免疫血清中或其它体液中存在的免疫复合物进行直接的不论什么机制的选择性吸收，吸附或附着的新组合物、新方法和新材料，用于鉴别、数量化或分离的目的。