[其他]用嗜热放线菌生产固定化葡萄糖异构酶的方法及其用于高果糖糖浆的生产方法无效
| 申请号: | 85100412 | 申请日: | 1985-06-25 |
| 公开(公告)号: | CN85100412B | 公开(公告)日: | 1988-02-10 |
| 发明(设计)人: | 贺家明;袁建国 | 申请(专利权)人: | 山东省食品发酵工业研究所 |
| 主分类号: | C12N9/92 | 分类号: | C12N9/92;C12P19/02;// |
| 代理公司: | 山东省专利服务处 | 代理人: | 徐槐 |
| 地址: | 山东省济*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用嗜热 放线菌 生产 固定 葡萄糖 异构酶 方法 及其 用于 果糖 糖浆 | ||
1、使用新的嗜热放线菌(嗜热链霉菌,Streptomyces)菌株生产固定化葡萄糖异构酶的方法,其特征在于所说的菌株StreptomycesM1033分泌胞外酶,胞外酶产生量占总酶的80%以上。该方法包括:
〈一〉培养(第一步异构酶菌种斜面,第二步种子罐,第三步发酵罐)。
〈二〉分离发酵液(板框压滤)。
〈三〉固定(挂酶)。
2、按照权利要求1所述的方法,其特征在于生产酶所用的菌株是StreptomycesM1033,其寄存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,寄存号为:CGMCCNO0032。
3、按照权利要求1和2所述的〈一〉培养(第一步异构酶菌种斜面,第二步种子罐,第三步发酵罐)方法,其特征在于培养的
第一步异构酶菌种斜面:是菌种首先在淀粉1-3%,硝酸钾0.05~0.5%,磷酸氢二钾0.01~0.1%,硫酸镁0.01-0.1%,氯化钠0.01-0.1%,硫酸亚铁0.001-0.005%,琼脂1.5-2%的斜面培养基上高温30°-50℃培养4-6天。
第二步种子罐:是把第一步得到的菌种斜面的胞子放入含麸皮3-8%,豆饼0.5-2%,硫酸镁0.05-0.2%,磷酸氢二钾0.05-0.2%,氯化钴0.005-0.05%,PH6.5-7.5的培养基上,通气量0.1升/升/分,高温35°-45℃培养种子15-24小时。
第三步发酵罐:是把第二步得到的种子液以5-15%的接种量放入发酵罐内,用含有麸皮3-8%,豆饼0.5-2%,硫酸镁0.05-0.2%,磷酸氢二钾0.05-0.2%,氯化钴0.005-0.05%,PH6.5-7.5的培养基上,通气量0.1-1升/升/分,高温35°-45℃发酵55-70小时,发酵液最后PH8-9。
4、按照权利要求1和2所述的〈二〉分离发酵液(板框压滤)方法,其特征在于把〈一〉培养(第一步异构酶菌种斜面,第二步种子罐,第三步发酵罐)所得到的发酵液,在室温下,用板框过滤机,经普通滤布过滤,得到清发酵液。
5、按照权利要求1和2所述的〈三〉固定(挂酶)方法,其特征在于把〈二〉分离发酵液(板框压滤)方法所得的清发酵液作酶液,采用中国天津南开大学研制的孔径为(5-10)×10-5毫米转为氯型或硼酸根型的大孔强碱性苯乙烯系季胺基阴离子交换树脂为载体,以1公斤干载体作用30-60升清发酵液的比例,在80-180转/分搅拌下,吸附清发酵液中的游离葡萄糖异构酶,则可得到本发明所述的固定化葡萄糖异构酶。
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