[发明专利]一种评估三阴乳腺癌复发和预后的生物标志物及其应用

说明书

本发明公开了一种评估三阴乳腺癌复发和/或预后的生物标志物，该生物标志物为KLHL22蛋白表达水平。本发明还公开了所述生物标志物在制备评估三阴乳腺癌复发和/或预后的试剂中的用途。本申请首次发现，高风险三阴乳腺癌组织和血液样本中KLHL22蛋白表达水平显著高于低风险三阴乳腺癌样本,检测KLHL22蛋白表达水平可评估三阴乳腺癌复发,并且KLHL22蛋白表达水平可以作为三阴乳腺癌的独立预后生物标志物，提示KLHL22蛋白表达水平可作为评估三阴乳腺癌复发和/或预后的分子标志。本发明为三阴乳腺癌的复发和/或预后评估提供了新的特异性分子标志物，临床应用前景广阔。

技术领域

本发明属于肿瘤分子生物学技术领域，具体涉及一种评估三阴乳腺癌复发和预后的生物标志物及其应用。

背景技术

三阴乳腺癌（TNBC）约占所有乳腺癌的 15-20％,是一个预后非常差的类型。三阴乳腺癌的雌激素受体（ER），孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体 2（HER2）均为阴性，且缺乏早期发现的生物标志物和有效的治疗靶点，因此一经发现，通常被诊断为组织学等级高的晚期肿瘤，难以从内分泌治疗或靶向治疗中获益。此外，三阴乳腺癌患者通常具有高转移和远端复发的风险，是预后最差的一种分型，无病生存期（DFS）和总体生存期（OS）相较于其他分型明显缩短。因此，开发用于评估三阴乳腺癌复发和预后的特异性分子标志物是降低三阴乳腺癌复发转移、提高病人生存率，降低死亡率的关键。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种评估三阴乳腺癌复发和/或预后的生物标志物，可用于预测三阴乳腺癌复发及预后评估。

为实现上述目的，本发明提供了KLHL22蛋白表达水平作为生物标志物在筛选用于评估三阴乳腺癌复发和/或预后的试剂中的用途。

本发明还提供了KLHL22蛋白表达水平作为生物标志物在制备用于评估三阴乳腺癌复发和/或预后的试剂中的用途。

本发明还提供了检测KLHL22蛋白表达水平的试剂在制备用于评估三阴乳腺癌复发和/或预后的试剂盒中的用途。

优选地，所述检测KLHL22蛋白表达水平的试剂包括能与KLHL22蛋白特异性结合的抗体。

本发明所述KLHL22蛋白表达水平是指：通过免疫组化染色细胞质中KLHL22蛋白显色情况来评估其表达水平。阳性染色细胞呈棕色或黄色。免疫反应性评分采用阳性细胞数和阳性强度评分，评分方法如下:(i)每片取5个视野，以5%的增量从0到100%对阳性肿瘤细胞百分比进行计数，0表示阴性染色。(ii)我们将正强度评分定义为负(0)、弱(1)、中(2)、强(3)四个等级。(iii)从强度和比例(0-300分)中得出总分。然后用ROC曲线确定TNBC中KLHL22表达水平的临界值。另外，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血液中KLHL22蛋白表达水平。将保存于-80℃冰箱的全血标本复溶后于1000×g离心20分钟，取上清进行ELISA检测。血清样本中KLHL22蛋白表达水平和样本颜色深浅呈比例关系。绘制标准样品曲线后，将读取的吸光值带入公式得出样本浓度。

本申请发明人首次发现，高风险三阴乳腺癌样本中KLHL22蛋白表达水平显著高于低风险三阴乳腺癌，检测KLHL22蛋白表达水平可评估三阴乳腺癌的复发风险，并且KLHL22蛋白高表达水平与较差的临床分期、较高的复发率显著相关，另外KLHL22蛋白高表达水平与与较短的平均生存时间、总生存期和无进展生存期显著相关，KLHL22蛋白表达水平可以作为三阴乳腺癌的临床分期、复发率以及平均生存时间、总生存期和无进展生存期的独立预后生物标志物，提示KLHL22蛋白表达水平可作为三阴乳腺癌复发和/或预后的分子标志。

本发明还提供了一种评估TNBC复发和/或预后的试剂盒，所述试剂盒包含检测KLHL22蛋白表达水平的试剂。

优选地，所述试剂盒还包括能与所述抗体结合的二抗。

优选地，所述二抗标记有辣根过氧化物酶。