[发明专利]一株赖氨酸生产菌株及用途，生产赖氨酸的方法

权利要求书

1.一株赖氨酸生产菌株，其特征在于：所述赖氨酸生产菌株为谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）cglzh1004，菌种保藏编号为CGMCC No.25467。

2.权利要求1所述的赖氨酸生产菌株的用途，其特征在于：所述谷氨酸棒杆菌cglzh1004发酵生产赖氨酸。

3.一种采用权利要求1所述的赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的方法，其特征在于：包含如下步骤：

（1）菌种活化，将保藏的谷氨酸棒杆菌cglzh1004甘油管菌种接种于无菌固体活化种子培养基培养，培养温度30~40℃，培养20h；在无菌超级台上用接种针取培养后菌体划线于平板上，培养温度30~40℃，培养16h；挑取平板中的单菌落划线接种于斜面培养基中，培养温度30~40℃，培养16h；

（2）菌种培养，将活化后的谷氨酸棒杆菌cglzh1004菌种接至无菌液体种子培养基中进行培养，培养至对数生长期，菌种培养条件：温度30~40 ℃、pH值6.5~7.5、罐压0.02~0.08MPa；

（3）发酵培养，将步骤（2）制得的对数生长期菌种接入无菌发酵培养基中进行发酵培养，发酵培养条件：温度30~40℃、pH值6.5~7.5、罐压0.02~0.10 MPa；发酵过程中通过调整搅拌转速和通气量进行溶氧控制，溶氧控制10~30%；发酵过程中通过控制补糖流量控制残糖含量在0.05~2%；发酵过程中通过控制补硫酸铵流量控制发酵液中AN含量在0.05~2%；培养至30~50 h结束培养，得到L-赖氨酸发酵液；

（4）提取纯化，将步骤（3）得到的L-赖氨酸发酵液进行后续处理，一部分L-赖氨酸发酵液通过膜过滤去除菌体得到过滤清液，将过滤清液进行离子交换，收集赖氨酸富集液，再进行蒸发浓缩结晶，然后降温冷却结晶，进一步离心去除母液，得到湿晶，将湿晶进行干燥，得到L-赖氨酸晶体；另一部分赖氨酸发酵液通过蒸发浓缩系统进行浓缩，然后浓缩液中加入前一步陶瓷膜过滤后的浓菌浆和离心母液，加入辅料进行配制，将配制液进行喷浆造粒干燥，得到低含量饲料级L-赖氨酸颗粒产品。

4. 根据权利要求3所述的赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的方法，其特征在于：所述菌种培养的种子培养基包含葡萄糖60~100 g/L、豆粕水解液1~20 g/L、硫酸铵5~40 g/L、磷酸二氢钾1~10 g/L、硫酸镁0.05~5 g/L、微量元素0.05~200mg/L。

5. 根据权利要求3所述的赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的方法，其特征在于：所述发酵培养的培养基包含葡萄糖20~80g/L、豆粕水解液0.5~10g/L、玉米浆1~30g/L、硫酸铵5~40g/L、磷酸0.05~10g/L、硫酸镁0.05~5g/L、氯化钾0.1~10 g/L、微量元素0.05~200mg/L。

6. 根据权利要求5所述的赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的方法，其特征在于：所述发酵培养的培养基中葡萄糖的浓度为55.69g/L、豆粕水解液的浓度为5.94 g/L、玉米浆的浓度为13.81 g/L。

7.根据权利要求4-6任一项所述的赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的方法，其特征在于：所述微量元素包含铁、钠、锌、钾、铜、锰。

8.根据权利要求3所述的赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的方法，其特征在于：膜过滤设备为陶瓷膜，孔径为8nm~50nm。

9.根据权利要求3所述的赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的方法，其特征在于：蒸发浓缩结晶设备为单效或多效蒸发结晶器，蒸发温度为50~75℃，真空度为-0.08~-0.10MPa，浓缩比为3~10倍。

10.根据权利要求3所述的赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的方法，其特征在于：降温冷却结晶设备为冷却结晶器，降温控制速度为2~5℃/h，最低温度为5~15℃。