[发明专利]一种同时传感ONOO-

说明书

本发明公开了一种同时传感ONOOsupgt;‑/supgt;与pH的BODIPY类荧光探针的制备方法及应用。本发明基于BODIPY荧光团，引入具有线粒体靶向功能的吲哚盐基团，得到同时传感ONOOsupgt;‑/supgt;与pH的荧光探针。当探针传感ONOOsupgt;‑/supgt;时，会呈现比率型荧光信号；当传感pH时，会呈现荧光强度增强信号。通过该探针不同的荧光信号变化监测动物炎症组织中的ONOOsupgt;‑/supgt;与pH变化，基于炎症组织中ONOOsupgt;‑/supgt;水平的增加以及pH的下降存在高度相关性，对ONOOsupgt;‑/supgt;与pH的检测可以用于炎症疾病的病理性研究和诊断。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及了一种同时传感ONOO^-与pH的BODIPY类荧光探针的制备方法及应用。

背景技术

ONOO^-作为生物体内很重要的活性氮(RNS)之一，在维持生物体内环境稳态具有一定的协调与帮助，但是异常水平的ONOO^-会导致细胞中的细胞器造成氧化损伤，甚至会导致细胞发生凋亡，因此会进一步引发生物体组织或器官发生病变导致疾病发生。而在细胞凋亡过程中，往往会伴随细胞内环境pH的降低(酸化)，如线粒体内环境的pH值会由稳定状态的pH～8.4降低至pH～6.0。因此设计一种同时传感ONOO^-与pH的荧光探针有利于认识生物体内两者之间的相互作用关系，研究生物体内复杂的生理和病理变化过程，并且有助提高疾病诊断的准确性。

荧光成像技术具有优异的时空采样能力，较高的灵敏度和无创性的优点，受到广泛关注。硼氟二吡咯(BODIPY)作为成像技术所需要的荧光染料之一，具有较高的荧光量子产率、较大的摩尔吸光系数、较低的细胞毒性以及良好的化学稳定性等特点。同时BODIPY主体结构容易进行功能化修饰，从而优化染料结构并精细调节光谱特性。

发明内容

本发明目的是提供一种同时传感ONOO^-与pH的BODIPY类荧光探针的制备方法及应用。本发明基于BODIPY荧光团，引入具有线粒体靶向功能的吲哚盐基团，得到同时传感ONOO^-与pH的荧光探针。当探针传感ONOO^-时，会呈现比率型荧光信号；当传感pH时，会呈现荧光强度增强信号。通过该探针不同的荧光信号变化监测动物炎症组织中的ONOO^-与pH变化，基于炎症组织中ONOO^-水平的增加以及pH的下降存在高度相关性，对ONOO^-与pH的检测可以用于炎症疾病的病理性研究和诊断。

所述的同时传感ONOO^-与pH的BODIPY类荧光探针的结构式如下所示：

其中X为OH、COOH或N(CH3)2。

所述的同时传感ONOO-与pH的BODIPY类荧光探针的制备方法为：在氮气或惰性气体保护下，将MOBDP-CHO与吲哚盐化合物按照1:1-1.3的摩尔比溶解于无水乙醇中，78-85℃回流反应6-8h后，冷却至室温，减压蒸发得到粗产物，最后经硅胶柱色谱纯化。

所述吲哚盐化合物为1,2,3,3-四甲基-3H-吲哚碘化物、1-乙基-2,3,3-三甲基-3H-吲哚碘化物、1,1,2,3-四甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-碘化物、1,2-二甲基苯并吲哚碘化物中的一种或几种。

所述的MOBDP-CHO的结构式为：

上述同时传感ONOO-与pH的BODIPY类荧光探针在制备活细胞中的ONOO-与pH的传感试剂或成像试剂的应用。

上述同时传感ONOO-与pH的BODIPY类荧光探针在制备监测炎症组织中的ONOO-与pH的试剂的应用。

本发明的有益效果在于：