[发明专利]一种检测生物组织中甘油含量的方法

说明书

本申请提供一种检测生物组织甘油含量的方法，其中，包括下述步骤：对预处理后的生物组织进行甘油提取处理以获得甘油储备液；向所述甘油储备液中依次加入高碘酸钠溶液和乙酰丙酮溶液进行显色反应；对经过显色反应的甘油储备液进行吸光度检测。本申请还提供一种检测生物组织水含量的方法，包括利用所述检测生物组织甘油含量的方法计算。本申请简化了滴定法的复杂操作，节约了时间并且易于操作，并且在降低了检测所需的成本的同时保证了高准确度及高精确度，该方法避免了滴定法繁琐耗时的过程，可以实现大样本量的同步检测。

技术领域

本申请涉及分子生物领域，主要涉及一种检测生物组织中甘油含量的方法。

背景技术

心脏瓣膜病是一种常见的心脏病，是指二尖瓣、三尖瓣、主动脉瓣和肺动脉瓣因风湿热、黏液变性、退行性改变、先天性畸形、缺血性坏死、感染或创伤等出现病变，影响血液的正常流动，从而造成心脏功能异常，最终导致心力衰竭的单瓣膜或多瓣膜病变。心脏瓣膜病的治疗主要以药物治疗和心脏瓣膜置换手术为主。

生物瓣膜是广泛应用于心脏瓣膜置换手术中的生物材料，用于替换受损的瓣膜。其中，干态瓣膜是将生物瓣膜经脱水干燥处理后，以干态形式储存的一类生物瓣膜。干态瓣膜规避了以戊二醛溶液作为保存液储存瓣膜的相关风险，例如大量醛基的残留易引发细胞毒性，增加瓣膜钙化风险，导致瓣膜衰坏，耐久性降低等。此外，干态瓣膜的储存和运输更加便捷和经济。

在干态瓣膜制备过程中，以脱水剂处理制备干态瓣膜的方式是较为常用的脱水形式。脱水剂一般由脂肪醇、多元醇、糖类及水等成分单独或组合使用。其中，甘油为较常用的多元醇，其优异的保湿吸水能力可在脱水过程中保护生物瓣膜的内部结构。在进行干燥处理前，生物瓣膜会被浸泡在含有甘油的脱水剂溶液中进行初步脱水，以减少瓣膜在后续干燥过程中的损伤。在瓣膜处理完成后，需要对瓣膜中的甘油含量进行检测，以确保瓣膜质量符合使用要求。

发明内容

甘油具有较强的吸水性，可置换出组织中大部分水分。为准确分析脱水后生物组织中甘油及其它组分所占比重，评估脱水效果以及制定终产品甘油残余量接受标准，需建立准确又高效的甘油含量测试方法。由于甘油质地粘稠，吸湿性强，无法利用称重法评估生物组织的成分含量。目前检测甘油的主要方法为色谱法、滴定法及酶检测法，分别具有检测成本高、耗时及试剂昂贵的问题。

针对上述技术问题，本申请提供了一种检测生物组织中甘油含量的方法，通过比色法检测生物组织中的甘油含量，该方法易操作，成本低且准确度及精密度高，可实现大样本量的同步检测。

本申请具体技术方案如下：

1.一种检测生物组织甘油含量的方法，其中，包括下述步骤：

对预处理后的生物组织进行甘油提取处理以获得甘油储备液；

向所述甘油储备液中依次加入高碘酸钠溶液和乙酰丙酮溶液进行显色反应；

对经过显色反应的甘油储备液进行吸光度检测。

2.根据项1所述的检测生物组织甘油含量的方法，其中，所述预处理包括对生物组织依次进行交联固定、样品裁剪、脱水处理和干燥处理。

3.根据项1所述的检测生物组织甘油含量的方法，其中，所述甘油提取处理步骤包括：

利用甘油提取液对经过预处理后的生物组织进行浸泡，优选在室温下振荡浸泡0.5h～3h，振荡频率为100rpm～200rpm。

4.根据项3所述的检测生物组织甘油含量的方法，其中所述甘油提取液为纯水或生理盐水。

5.根据项1所述的检测生物组织甘油含量的方法，其中，在进行显色反应时，高碘酸钠的终浓度为0.001mol/L～0.005mol/L，优选0.002mol/L～0.003mol/L。