[发明专利]一种亮果桉的组培快繁方法

权利要求书

1.一种亮果桉的组培快繁方法，包括以下操作步骤：

S1：对于亮果桉的选择与处理步骤；

S11：以亮果桉的叶片以及作为亮果桉的枝桠外植体，选择的是刚展开的嫩叶以及刚长出来的枝桠，该两组的外物体均为刚长出来的，其污染物较少，可以降低其实验的失败率，另外，所选择的嫩叶以及枝桠的生长机能为旺盛的，并且后期再将该两组嫩叶以及枝桠接种到培养基内部；

S12：将外植体进行消毒外植体经自来水冲洗，先用70％酒精浸泡1min，再用5％次氯酸钠浸泡1min，最后用无菌水清洗1min，并且通过沥干水分，随后再将叶片以及枝桠分切成1cm*1cm的大小，随后才能进行培养；

S2：培养阶段：

S21：将分切好的外植体放入初代培养基中培养，培养温度为15-25℃，光照1000-1500lx，光照10-12h/d，接种后11-14d，接种的叶片切片出现愈伤组织，培养20-24d后，可将得到的愈伤组织转接到增殖培养基中做继代培养；

S22：初代培养基中培养，培养温度为15-25℃，光照1000-1500lx，光照10-12h/d，接种后11-14d，接种的叶片切片出现愈伤组织接种到增殖培养基中进行增殖，培养温度为25-28℃，光照1500-2000lx，光照10-12h/d，经过40-60天后可转接；

S23：培养温度为15-25℃，光照1500-2000lx，光照10-12h/d，经过40-60天后增殖培养基中得到的愈伤组织接种到芽增殖培养基中进行芽诱导培养，培养温度为15-25℃，光照500-800lx，光照10-12h/d，此后外植体会产生大量的芽；

S24：培养温度为15-25℃，光照500-800lx，光照10-12h/d增殖培养基中得到的高为2-3cm的芽接种到生根培养基，在5-7天会长出根，待到幼苗长出2-3片叶子时即可出培养基进行移栽；

S3：移栽阶段：

当试管苗长出2-3片叶子，并生有较多的新根时，即可出瓶进行移栽，基质可采用经过灭菌处理的混合培养土，常用成分为：60％的菜园果园土(肥力强)，20％的腐叶土(富含腐殖质，保温性好)，20％的粗沙土或炉灰土(使土壤疏松、透气)，移栽前期，要将环境的空气湿度保持在80％-90％之间，遮光率为50％-60％，环境温度控制在22-25℃之间，在移栽过程中，附着在大苗基部的小苗无需去除，这样更利于成活，当移栽苗长大后，可在定植过程随之进行分株种植。

2.根据权利要求1所述的一种亮果桉的组培快繁方法，其特征在于：所述初代培养基由：MS(每升取4.74g)+6-BA2.0mg/L溶液(6-BenzylAminopurine母液为1mg/mL，每升加入2000微升)、NAA0.4mg/L溶液(Naphthylaceticacid母液为1mg/mL，每升加入400微升)、蔗糖30g/L以及卡拉胶5g/L组成。

3.根据权利要求1所述的一种亮果桉的组培快繁方法，其特征在于：所述增殖培养基由：MS(每升取4.74g)+6-BA2.0mg/L溶液(6-BenzylAminopurine母液为1mg/mL，每升加入2000微升)、NAA0.5mg/L溶液(Naphthylaceticacid母液为1mg/mL，每升加入500微升)、蔗糖30g/L以及卡拉胶5g/L组成。

4.根据权利要求1所述的一种亮果桉的组培快繁方法，其特征在于：所述芽诱导培养基由：MS(每升取4.74g)+6-BA2.0mg/L溶液(6-BenzylAminopurine母液为1mg/mL，每升加入2000微升)、NAA0.4mg/L溶液(Naphthylaceticacid母液为1mg/mL，每升加入400微升)、蔗糖30g/L以及卡拉胶5g/L组成。

5.根据权利要求1所述的一种亮果桉的组培快繁方法，其特征在于：所述生根培养基由：MS(每升取4.74g)+6-BA2.0mg/L溶液(6-BenzylAminopurine母液为1mg/mL，每升加入2000微升)、NAA0.5mg/L溶液(Naphthylaceticacid母液为1mg/mL，每升加入400微升)、蔗糖30g/L以及卡拉胶5g/L组成。