[发明专利]用于促进内体及溶酶体生物降解的碳氢订书肽

说明书

本发明涉及一种Beclin1‑UVRAG复合体结构，而Beclin1和UVRAG卷曲螺旋形组件的残基紧密互补形成稳定的二聚体复合物。这种有效的物理相互作用对于依赖UVRAG的EGFR降解是关键的，但不影响自噬。针对Beclin1卷曲螺旋形结构域而设计的订装肽可导致非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系增强自噬活性和EGFR降解，显示这些化合物的价值。

此专利申请以申请号为62/355，883于2016年6月29日申请的美国专利申请作为优先权。上述提及的专利申请的所有内容和公开都结合在此申请中。

在此专利申请中的所有不同的参考文献和公开都在此合并到此专利申请中从而更全面描述此发明从属的技术领域。

技术领域

本发明涉及肽类似物，可以通过特异性靶向Beclin1-Vps34复合体以促进自噬。

背景技术

紫外线辐射耐受相关基因(UV irradiation resistance-associated gene，UVRAG)参与了多种细胞生理过程，包括自噬(autophagy)，内吞运输(endocytictrafficking)和染色体维持(chromosome maintenance)。UVRAG最初在cDNA文库中被筛选出来，是因其可以部分互補着色性干皮症(xeroderma pigmentosum)细胞株的紫外线敏感度的能力(Perelman等人，1997)。最近，UVRAG被发现是三型磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphotidylinositol 3-Kinase，PI3K)复合体的关键调控因子(key regulator)。PI3K复合体是自噬的分子机制中一个关键构件，由两个主要成员包括支架蛋白(scaffoldingprotein)Beclin 1和脂质激酶(lipid kinase)VPS34组成。通过与Beclin 1高效及特异的相互作用，UVRAG与Beclin1-VPS34形成复合体而增强脂质激酶的活性，从而促进与VPS34相关的细胞生理过程，如自噬(Liang等人，2006；Liang等人，2007)。UVRAG亦被发现能与C型Vps复合体协同作用而调控内吞运输(Liang等人，2008a；Liang等人，2008b)。此外，UVRAG通过与涉及同源末端连接的中心体蛋白CEP63和DNA-PK的相互作用，可以帮助维持染色体的结构完整性和正常的染色体分离(Zhao等人，2012)。

UVRAG包含两个在序列比对上已能充分预测的功能结构域。UVRAG的N末端C2结构域可以与膜结合，并参与自噬与内吞运输(Liang et al.，2006)。UVRAG的卷曲螺旋形结构域(coiled coil domain)在与主要的自噬支架蛋白Beclin 1的结合上至为重要。它们的结合形成了一个包含UVRAG以促进自噬的Beclin 1-VPS34复合体(Liang等人，2006)。除了这两个结构域外，UVRAG N末端的一段富脯胺酸的序列亦会与Bif-1的SH3结构域相互作用，这可能令Bif-1能够通过膜弯曲BAR结构域(membrane-curving BAR domain)促使自噬体(autophagosome)的形成(Takahashi等人，2007；Takahashi等人，2009)。此外，在卷曲螺旋形结构域和C末端PEST样序列之间的区域会参与到与C型Vps复合体、CEP63和DNA-PK的相互作用(Liang等人，2008a；Zhao等人，2012)。

至今仍未有原子水平的UVRAG结构，而对于UVRAG的多个功能结构域与各自的配体联合进而调节自噬、内吞运输和染色体分离的多种细胞生理过程的分子机制亦尚未清楚。