[发明专利]新品种‘步步高凤梨’组培种苗繁殖方法

说明书

本发明公开了新品种‘步步高凤梨’组培种苗繁殖方法。本发明以腋芽为外植体，经过外植体分段消毒法消毒、丛生芽诱导、丛生芽增殖、壮苗生根、炼苗移栽等阶段，筛选出适宜的外植体消毒方法、各阶段适宜培养基配方和培养条件，建立以腋芽为外植体的组培快繁技术体系，为观赏凤梨种苗规模化生产提供技术支持。本发明具有腋芽消毒成功率高、繁殖周期短等特点，切实可行，适合种苗工厂化生产。

技术领域

本发明属于植物种苗生产技术领域，具体涉及观赏凤梨新品种组培种苗繁殖方法。

背景技术

观赏凤梨是具有观赏价值的凤梨科(Bromeliaceae)植物的总称，是世界各地广受欢迎的著名高档盆花。自然状态下观赏凤梨很难通过种子获得种苗，而且通过种子繁殖获得的后代容易发生性状分离；分株或扦插繁殖具有繁殖系数低、整齐度低、周期长等问题，因此都不是种苗规模化生产理想的获取方式。采用植物组织培养技术能有效解决这个问题，但目前观赏凤梨通用的组培快繁模式存在腋芽外植体消毒成功率低、中间繁殖体诱导、增殖困难等问题。

观赏凤梨组培快繁通常有两种途径，一种是直接器官发生途径，即外植体直接诱导形成不定芽，由不定芽增殖产生丛生芽，经壮苗生根培养得到无菌种苗，该途径增殖效率较低；另一种是间接器官发生途径，即外植体经诱导形成愈伤组织，通过愈伤组织分化产生丛生芽，经壮苗生根培养得到无菌种苗，该途径进程缓慢。以腋芽为外植体，经诱导形成丛生芽，将丛生芽分割成芽丛后经增殖、壮苗生根培养得到大量无菌种苗，有效提高了种苗生产效率。

发明内容

本发明的目的在于提供观赏凤梨新品种‘步步高凤梨’组培种苗繁殖方法，为观赏凤梨种苗规模化生产提供技术支持。

本发明采取的技术方案如下：

新品种‘步步高凤梨’组培种苗繁殖方法，包括以下步骤：

(1)外植体分段消毒：取长势健壮一致的腋芽作为外植体，剥去外层叶片，切去上部分叶片及茎基部部分组织，进行消毒；

(2)丛生芽诱导：将经消毒的带4～5片叶的腋芽外植体接入诱导培养基中培养，待腋芽茎基部周围产生丛生芽时将茎基部的叶片切去后进行转接，茎基部丛生芽逐渐伸长；所述诱导培养基配方为：MS+6-BA0.2～2.0mg/L+NAA0.05～0.2mg/L+蔗糖20～30g/L+琼脂6～7g/L，溶剂为水，pH 5.8～6.0；

(3)丛生芽增殖：将含2～3个芽体的芽丛接种到增殖培养基中进行培养，获得大量丛生芽；所述增殖培养基配方为：MS+6-BA0.2～2.0mg/L+NAA0.02～0.1mg/L+蔗糖20～30g/L+琼脂6～7g/L，溶剂为水，pH 5.8～6.0；

(4)壮苗生根：将丛生芽分成单株，选择3～4cm长的芽体接种到壮苗生根培养基中进行壮苗生根培养，得到组培苗；所述生根培养基配方为：1/2MS+NAA0.1～2.0mg/L+蔗糖20～30g/L+琼脂6～7g/L，溶剂为水，pH 5.8～6.0；

(5)炼苗移栽：当组培苗长到6～8cm高时，在温室中炼苗5～8天，然后将组培苗从培养瓶中取出，洗干净根部培养基，栽种于泥炭土基质中。

优选的，步骤(1)的消毒步骤具体为：流水下冲洗30min，75％酒精浸泡1～2min，无菌水冲洗三次；剥除外层叶片，0.1％ HgCl₂溶液浸泡7～9min，无菌水冲洗三次；再次剥除外层叶片，0.1％ HgCl₂溶液浸泡3～5min，无菌水冲洗三次，自然晾干。

优选的，步骤(2)中，所述的将茎基部的叶片切去，具体是将茎基部往上1cm位置的所有叶片切去。

优选的，步骤(2)、(3)、(4)的培养条件为：培养温度24～28℃，光照强度35～40μmol/m².s，光照时间10～14h/d。