[发明专利]一种腺相关病毒聚集度检测方法和系统

说明书

本发明提供一种腺相关病毒聚集度检测方法和系统，对腺相关病毒原液稀释后进行动态光散射得到相应稀释倍数的颗粒参数，通过稀释倍数和颗粒参数之间的拟合关系确定合适的稀释倍，通过检测合适的稀释倍数稀释后得到的样品得出腺相关病毒原液的聚集度。本发明实施例的一种腺相关病毒聚集度检测方法和系统，通过对稀释后的腺相关病毒原液进行动态光散射得到用于检测的聚集度数据，从很大程度上简化了检测过程而且降低了检测成本，更加符合工艺开发阶段及生产过程对腺相关病毒样品进行快速准确检测的需要。

技术领域

本发明涉及腺相关病毒检测领域，特别涉及一种腺相关病毒聚集度检测方法；此外，本发明还涉及一种腺相关病毒聚集度检测系统。

背景技术

病毒载体是指经改造用于介导外源基因转移和/或表达的病毒颗粒，常见如腺相关病毒载体、腺病毒载体、单纯疱疹病毒载体等。腺相关病毒是目前最广泛的病毒载体之一，其作为病毒载体，具有安全性良好、免疫原性低、感染率高等优点。

腺相关病毒属于细小病毒科伴随病毒属颗粒无包膜，呈二十面体结构，直径为20-26nm，可以形成不同大小的聚集体，其聚集体能够影响临床试验的免疫原性，需要将其作为产品相关物质或产品相关杂质进行控制。而目前对于纳米级别的颗粒的聚集度检测，可采用分子尺寸排阻色谱、透射电子显微镜、分析型超速离心等手段。然而，以上手段检测的过程都较为复杂，检测成本较高。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明的至少一个实施例提供了一种腺相关病毒聚集度检测方法，从很大程度上简化了检测过程而且降低了检测成本。为此，本发明的至少一个实施例还提供一种腺相关病毒聚集度检测系统。

第一方面，本发明实施例提出一种腺相关病毒聚集度检测方法，方法包括：

对腺相关病毒原液稀释后进行动态光散射得到相应稀释倍数的颗粒参数；

通过稀释倍数和颗粒参数之间的拟合关系确定合适的稀释倍数；

通过检测合适的稀释倍数稀释后得到的样品得出腺相关病毒原液的聚集度。

在一些实施例中，本发明提供的一种腺相关病毒聚集度检测方法，得到相应稀释倍数的颗粒参数还包括以下步骤：

对腺相关病毒原液稀释后进行动态光散射并记录相应的数据；

通过对记录的数据正则化分析得到相应稀释倍数的颗粒参数。

在一些实施例中，本发明提供的一种腺相关病毒聚集度检测方法，还包括对腺相关病毒原液进行冻融操作。

在一些实施例中，本发明提供的一种腺相关病毒聚集度检测方法，颗粒参数包括多分散度、流体力学直径、质量百分比和光强百分比。

在一些实施例中，本发明提供的一种腺相关病毒聚集度检测方法，稀释倍数和流体力学直径通过动态光散射的自相关函数的拟合关系确定合适的稀释倍数。

在一些实施例中，本发明提供的一种腺相关病毒聚集度检测方法，对腺相关病毒原液稀释采用稀释缓冲剂。

在一些实施例中，本发明提供的一种腺相关病毒聚集度检测方法，稀释缓冲剂为与腺相关病毒原液相对应的制剂缓冲剂。

第二方面，本发明实施例还提供了一种腺相关病毒聚集度检测系统，包括：

稀释模块，用于对腺相关病毒原液进行稀释；

动态光散射模块，用于对所述腺相关病毒原液或采用合适的稀释倍数稀释后的样品进行动态光散射；

拟合模块，用于通过稀释倍数和颗粒参数之间的拟合关系确定合适的稀释倍数；

检测模块，用于通过检测合适的稀释倍数稀释后得到的样品得出腺相关病毒原液的聚集度。