[发明专利]水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7突变体构建及其应用在审
| 申请号： | 202310245629.1 | 申请日： | 2023-03-15 |
| 公开（公告）号： | CN116286954A | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 程金平;尹璐;张红生;李爽;李润;闫雨濛;朱沛文;陈永吉;陈孙禄;鲍永美;黄骥 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/29;C12N15/11;A01H6/46;A01H5/10;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 竞存;徐冬涛 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 水稻 赤霉素 分解 基因 osga2ox7 突变体 构建 及其 应用 | ||
1.敲除水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7在提高水稻种子活力中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，敲除水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7在正常条件和/或在盐条件下提高水稻种子活力。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述提高种子活力包括提高种子萌发率和/或提高种子萌发指数和/或提高成苗率和/或改良水稻种子活力遗传特性。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
6.一种提高水稻种子活力的方法，其特征在于，所述方法为基于CRISPR/Cas9基因编辑技术构建水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7敲除突变体，获得提高水稻种子活力的植株。
7.据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)水稻基因OsGA2ox7突变体转基因构建：筛选水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7的敲除靶位点，根据敲除靶位点，设计OsGA2ox7靶位点敲除引物，获得OsGA2ox7基因的点突变目标片段靶序，构建载体后转化水稻，获得水稻OsGA2ox7 CRISPR/Cas9突变体；
(2)水稻突变体筛选与鉴定：采用靶点检测引物扩增水稻OsGA2ox7 CRISPR/Cas9突变体幼叶中基因组，进行常规PCR产物测序，筛选纯合突变体植株，即为提高水稻种子活力的植株。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7的敲除靶位点1如SEQ ID NO.3所示，敲除靶位点2如SEQ ID NO.4所示。
9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，敲除引物序列如SEQ ID NO.5-SEQ IDNO.8所示。
10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，靶点检测引物如SEQ ID NO.10和SEQ IDNO.11所示。
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