[发明专利]一种基于光交联基团的三功能探针及其制备方法和应用

说明书

本发明属于探针技术领域，提供了一种基于光交联基团的三功能探针及其制备方法和应用。该方法包含下列步骤：在保护气氛下，将化合物1、化合物2、1‑羟基苯并三氮唑、二甲基甲酰胺、碳二亚胺和N,N‑二异丙基乙胺混合，进行缩合反应得到基于光交联基团的三功能探针。本发明提供的探针可与黄芩素、TFAE、黄芩含药血清发生键合，形成相对应的探针，并与其原化合物发生竞争。在不同紫外光波长激发下探针能够实现与中药中小分子和靶蛋白交联，并通过“报告基团”精确地反映出反应基团在蛋白质组中对靶标蛋白标记水平的高低，还能将被标记的靶蛋白选择性地富集出来，通过后续实验实现单一化合物、化合物组合以及天然药物提取物靶点的鉴定。

技术领域

本发明涉及探针技术领域，尤其涉及一种基于光交联基团的三功能探针及其制备方法和应用。

背景技术

中药治疗是在长期医疗试验中积累起来并经过验证的有效治疗手段，其特色为多种药物的复方应用。现有研究多以还原论思想为指导，其主要研究方法是将中药的复杂体系分解成简单的单个化学组分，接着利用单个化学组分对其作用的药效靶点进行钩钓。靶点是中药活性成分发挥作用的基础，中药活性成分通过靶向作用于体内的生物大分子，调节其生物活性，进而调控靶点分子下游的细胞信号通路，扰动疾病网络，从而预防和治疗疾病。因此，明确中药活性成分作用靶点是中药研发的关键。目前，最突出、实用可以钩钓中药活性成分作用靶点的技术是将中药活性成分改造为活性探针。但是，这种方法也存在一定的局限性，比如探针在钩钓目标蛋白的同时可能将非特异性蛋白也富集下来，这样会对实验结果产生一定的误差。所以，提供一种能够高效实现中药复方靶点鉴定的探针具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的问题，提供一种基于光交联基团的三功能探针及其制备方法和应用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种基于光交联基团的三功能探针，所述三功能探针的结构为：

，

所述n为任意自然数。

作为优选，所述三功能探针的结构为：

、、、、或。

本发明还提供了所述基于光交联基团的三功能探针的制备方法，包含下列步骤：

在保护气氛下，将化合物1、化合物2、1-羟基苯并三氮唑、二甲基甲酰胺、碳二亚胺和N,N-二异丙基乙胺混合，进行缩合反应得到所述的基于光交联基团的三功能探针；

所述化合物1为，

所述化合物 2为，

所述n为任意自然数。

作为优选，所述化合物1、1-羟基苯并三氮唑、碳二亚胺和N,N-二异丙基乙胺的质量比为100~200：10~100：50~200：100~300。

作为优选，所述化合物1与二甲基甲酰胺的质量体积比为100~300mg：1~10mL。

作为优选，所述1-羟基苯并三氮唑与化合物2的摩尔比为0.2~3.5：0.1~2。

作为优选，所述缩合反应的温度为10~35℃，所述缩合反应的时间为1~5h。

本发明还提供了所述基于光交联基团的三功能探针在单一化合物、化合物组合以及天然药物提取物作用靶点鉴定中的应用。

本发明的有益效果是：

本发明提供了一种基于光交联基团的三功能探针，可以作为一种实现单一化合物、化合物组合以及天然药物提取物靶点鉴定的三功能探针而使用，与黄芩素、TFAE(黄芩素、汉黄芩素、千层纸素)、黄芩含药血清发生键合，形成相对应的探针，并与其原化合物发生竞争。