[发明专利]一种尿素中聚谷氨酸含量测定方法

说明书

本发明属于检测技术领域，具体公开一种尿素中聚谷氨酸含量测定方法，所述方法是先将待测样品溶液在高效液相色谱仪中测定，再按照标准曲线法以峰面积计算待测样品中的聚谷氨酸含量；所述高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱为水性凝胶色谱柱，流动相为硫酸钠溶液，浓度不小于0.2mol/L；流速：0.4～0.7mL/min；柱温：30～40℃；紫外检测器波长：200～210nm，通过本发明的测定方法，可以快速准确的测定出尿素中聚谷氨酸的含量，满足尿素生产过程控制和产品质量准确检验需求。

技术领域

本发明属于检测技术领域，具体涉及一种尿素中聚谷氨酸含量测定方法。

背景技术

聚谷氨酸（γ-聚谷氨酸，简称PGA），它是由D-或L-谷氨酸形成γ-酰胺键构成的一种可降解的高分子聚合物，分子量可以达到100万道尔顿以上，其降解产物是谷氨酸，对人体和环境不会有任何危害，可谓是一种环保的高分子有机化合物，具有超强的吸水性。

以分子量高于80万道尔顿的聚谷氨酸溶液或聚谷氨酸粉剂为增效原料，添加到尿素生产工艺中，制成含聚谷氨酸尿素产品，能有效提高肥料利用率，可促进植物根系发育，增强植物抗病及抗逆能力，改善农产品品质。

尿素中添加的聚谷氨酸，一般含量在400mg/kg以内，低含量聚谷氨酸无专用检测方法。对于含量在0.1%以上的水溶肥料，采用NY/T 3039-2016《水溶肥料 聚谷氨酸含量的测定》方法，使用氨基酸测定仪，分别测定试样中经盐酸溶液水解后的和未经水解的游离谷氨酸的含量，两者之差为聚谷氨酸含量。但氨基酸测定仪费用较高，且该方法耗时太长，单水解制样过程就需要24h以上，无法指导工艺生产；其次氨基酸测定仪测定的聚谷氨酸含量，无法判断其分子量大小，小分子的聚谷氨酸对农作物的增效作用并不大，无法评价产品品质。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种尿素中聚谷氨酸含量快速测定方法，以满足工业生产中的需求。

为实现以上目的，本发明提供以下技术方案：

一种尿素中聚谷氨酸含量测定方法，所述方法是先将待测样品溶液在高效液相色谱仪中测定，再按照标准曲线法以峰面积计算待测样品中的聚谷氨酸含量；所述高效液相色谱仪的色谱条件为：

色谱柱为水性凝胶色谱柱，流动相为硫酸钠溶液，浓度不小于0.2mol/L；流速：0.4～0.7mL/min；柱温：30～40℃；紫外检测器波长：200～210nm。

进一步的，所述水性凝胶色谱柱的使用压力≤3.0MPa。

进一步的，所述待测样品溶液的进样量为10～50μL。

进一步的，所述水性凝胶色谱柱的柱长25～35cm*4.6mm；填料：水性凝胶8μm，进样量为20μL。

优选的，所述硫酸钠溶液的浓度为0.3mol/L、0.4mol/L或0.5mol/L。

优选的，所述流速为0.5mL/min或0.6mL/min。

优选的，所述待测样品聚谷氨酸含量不小于50mg/kg。

本发明的有益效果：

1、聚谷氨酸含有紫外吸收基团，且相比谷氨酸单体，聚谷氨酸紫外摩尔吸收强度较强，可以采用紫外检测器直接进行检测。

2、聚谷氨酸属于高分子生物发酵产物，不同菌种、不同发酵工艺出产的聚谷氨酸原液分子量大小不同，添加到尿素中所能起到的作用也有差异，分子量越大，功效越好。

3、采用液相色谱法，尿素中聚谷氨酸经过凝胶色谱柱分离后，以分子量大小顺序出峰，根据保留时间，确认聚谷氨酸的分子量范围，对产品品质做出准确判断。

4、测定紫外吸收强度，通过外标法定量计算出聚谷氨酸含量，实现尿素中聚谷氨酸含量的准确测定。