[发明专利]一种立他司特中有关物质的检测方法

说明书

本发明涉及一种立他司特中有关物质的检测方法，筛选出恰当的色谱条件和溶解样品的溶剂，以0.01％～0.5％磷酸水溶液和乙腈作为混合流动相进行梯度洗脱，优化洗脱的时间和流动相的比例，实现杂质苯甲醇与各杂质之间的有效分离，检出的杂质多，灵敏度高、专属性好、耐用性高，主成分及各杂质在该检测方法中保留能力较强，响应较高，各成分间分离良好，可以快速准确的监控立他司特中的有关物质，对立他司特原料药和制剂的质量评估具有重要意义。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种立他司特中有关物质的检测方法。

背景技术

立他司特(lifitegrast)是新型的小分子整合素(integrin)抑制药，能拮抗淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)，阻断与其同源配体细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的相互作用，干扰引起干眼病的角膜与结膜组织的ICAM-1过度表达，是首个治疗干眼症症状和体征的药物。立他司特在合成及储存过程中引入多个杂质，需开发一种方法，对其中的杂质进行定量分析，严格控制立他司特的质量品质，保证产品质量符合要求。

立他司特，化学名为(S)-2-(2-(苯并呋喃-6-羰基)-5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6甲酰胺基)-3-(3-(甲基磺酰基)苯基)丙酸，结构式如下：

目前，关于立他司特中有关物质的检测方法虽有报道，但是仍然存在较多缺陷。例如，专利CN111060629A公开了一种采用高效液相法测定立他司特中有关物质的方法，但只能测定杂质A～F这6个杂质，而立他司特在合成及储存过程中引入的杂质不止这6个，显然无法实现对立他司特的质量的精准控制。

专利CN114689733A虽然报道了14个杂质的检测方法，但是相邻的杂质JP-Y-8、SM1和JP-Y-9杂质分离度不高，重现性比较差。而且，杂质JP-Y-12与溶剂峰极为接近，在稳定性检测过程中溶剂峰极可能会干扰杂质JP-Y-12的准确定量。尤为重要的是，在该专利报道的杂质中未报到苯甲醇，目前也尚未有关于立他司特中杂质苯甲醇的检测方法的报道，但该杂质在多批次参比制剂中检出，能否有效的检出和定量杂质苯甲醇，对于立他司特原料药和制剂的质量对比研究至关重要。

发明内容

本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种立他司特中有关物质的检测方法，检测出的杂质多、灵敏度高、专属性好，各杂质峰之间、立他司特及其相邻杂质峰之间的分离度好，能快速、有效、准确的监控立他司特原料药和制剂中的有关物质。

本发明的技术方案如下：

一种立他司特中有关物质的检测方法，该检测方法采用高效液相色谱对立他司特中有关物质进行定量检测，其高效液相色谱条件包括：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，以流动相A和流动相B为混合流动相进行梯度洗脱，流动相A为0.01％～0.5％磷酸水溶液，流动相B为乙腈；具体梯度洗脱过程如下：(1)在0-5分钟，流动相A和流动相B的体积比保持80～95:20～5不变；(2)在5-15分钟内，流动相A和流动相B的体积比由80～95:20～5匀速渐变至70:30；(3)在15-45分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持70:30不变；(4)在45-50分钟内，流动相A和流动相B的体积比由70:30匀速渐变至55:45；(5)在50-65分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持55:45不变；(6)在65-80分钟内，流动相A和流动相B的体积比由55:45匀速渐变至30:70；(7)在80-85分钟内，流动相A和流动相B的体积比保持30:70不变；(8)在85-86分钟内，流动相A和流动相B的体积比由30:70匀速渐变至80～95:20～5；(9)在86-95分钟，流动相A和流动相B的体积比保持80～95:20～5不变。

在本发明中，立他司特中有关物质的检测中待测样品为立他司特原料药或立他司特滴眼液。