[发明专利]一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒

说明书

本发明提供一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒，该试剂盒包括阻断剂、免疫标记的过敏原、能够与免疫标记结合且能够催化底物显色的过氧化物酶的复合物、能够被所述过氧化物酶催化显色的底物，阻断剂包括灭活的甲状腺过氧化物酶、中性粒细胞过氧化物酶、嗜酸性粒细胞过氧化物酶、辣根过氧化物酶、髓磷脂碱性蛋白中的一种或多种。利用本发明提供的试剂盒，能够有效避免自身过敏产生的IgE抗体对特异性过敏原检测的干扰，尤其是阻断了过氧化物酶类产生的IgE抗体的干扰，成功的消除了过氧化物酶类IgE抗体干扰导致的假阳性，提高了检测结果的准确性，且具有操作简便等优点。

技术领域

本发明具体涉及一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒。

背景技术

从免疫学的角度来看，在炎症反应期间，嗜酸性粒细胞和中性粒细胞可释放主要的髓磷脂碱性蛋白(myelin basicprotein，MBP)、嗜酸性粒细胞过氧化酶(eosinophilperoxidase，EPX)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationic protein，ECP)和中性粒细胞过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)等炎症介质。嗜酸性粒细胞颗粒蛋白和中性粒细胞过氧化物酶(MPO)的高释放或者甲状腺过氧化物酶(thyroid peroxidase，TPO)的存在可能诱导一种原发性免疫反应，例如刺激浆细胞产生抗EPX IgE。以荨麻疹为例，荨麻疹是一种常见的过敏疾病，比较多见的是以扩展性痒疹为特征的皮肤反应，这些症状是由于皮肤肥大细胞的活化和组胺及随后释放的其他促炎介质所导致的。有研究发现慢性自发性荨麻疹患者可产生抗甲状腺过氧化物酶IgE抗体。

由于酶联免疫捕获法具备方法成熟、快速、简便、易于标准化等优势，利用该方法检测待测样本中过敏原特异性IgE抗体在临床上已得到广泛应用。酶联免疫捕获法检测过敏原特异性IgE抗体试剂盒的原理是酶标板包被Anti-IgE捕获血清中总的IgE，总IgE中的特异性IgE再与对应生物素化过敏原反应，而后再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，催化底物显色，最后加入硫酸缓冲液终止反应在酶标仪450nm读数。该方法大大降低了IgG的干扰增加了特异性，同时又能够实现同一块酶标板根据需要同时检测不同过敏原，提高了用户的便利性。

但是，在临床上会遇到一些患者有如荨麻疹或同时伴有其他临床症状的过敏表征，在采用酶联免疫捕获法检测样本中过敏原特异性IgE抗体时，显示结果全部为阳性，导致医生无法判断，同时影响了过敏原特异性抗体检测试剂盒的准确度。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种能够降低假阳性、准确性高的过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：

本发明提供一种过敏原特异性IgE抗体检测的试剂盒，所述试剂盒包括阻断剂、免疫标记的过敏原、能够与免疫标记结合且能够催化底物显色的过氧化物酶的复合物和能够被所述过氧化物酶催化显色的底物；

所述阻断剂包括灭活的甲状腺过氧化物酶、中性粒细胞过氧化物酶、嗜酸性粒细胞过氧化物酶、辣根过氧化物酶和髓磷脂碱性蛋白中的一种或多种。

优选地，所述阻断剂为包括灭活的甲状腺过氧化物酶、中性粒细胞过氧化物酶、嗜酸性粒细胞过氧化物酶、辣根过氧化物酶和髓磷脂碱性蛋白的混合物。

优选地，所述试剂盒还包括缓冲液，所述缓冲液为pH为7.0～7.5的0.01～0.1MTris-HCl缓冲液，所述Tris-HCl缓冲液包括以下组份：10～100g/L BSA、占所述缓冲液体积0.5～2％Proclin-300、0.05～3g/L Brij-35及0.1～0.3M NaCl。

进一步优选地，所述缓冲液中BSA的浓度为10～50g/L，例如，15g/L、20g/L、25g/L、30g/L、35g/L、40g/L等。