[发明专利]OsFID基因在提高植物对真菌性病害抗性中的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及OsFID基因在提高水稻抗真菌性病害中的用途。本发明公开了与植物抗真菌性病害相关的水稻OsFID蛋白及其编码基因与应用。本发明解决技术问题的技术方案是提供了OsFID基因在提高植物抗病性方面的用途，经实验证明，OsFID基因可以被真菌性病原物高度诱导表达，此外，水稻转入了OsFID基因的过表达植株对稻瘟病和稻曲病产生了明显的抗性。本发明利用基因工程手段，为提高作物抗病性品种培育提供新的有效选择。

技术领域

本发明涉及分子生物学，以及转基因植物领域，尤其涉及的是OsFID基因在提高植物对真菌性病害抗性中的应用。

背景技术

水稻作为人类主要的粮食来源之一，它的产量制约着人类的发展。植物生活在暴露于多种微生物共存的环境中，其中许多微生物是具有致病性的。在病原菌侵染条件下植物能够分泌大量分泌蛋白到质外体空间。拟南芥分泌的蛋白酶SAP1,SAP2能够在病原菌侵染条件下被诱导，利用其蛋白酶活性直接参与抑制病原细菌侵染。说明质外体蛋白对植物抗病起到重要作用。然而，对于其他水稻胞外分泌蛋白是否参与植物对真菌性病害的耐受性所知甚少，对于其功能鉴定的研究报道也非常少，也在一定程度上反映了胞外分泌蛋白在植物抗病过程中的复杂性和特异性，因此，不断鉴定新型植物抗病蛋白，确定相关基因及其分子功能，将有助于全面揭示植物防御稻瘟菌侵染的机制，也将有助于深入揭示植物广谱抗病的分子机制，进而为抗稻瘟病的水稻品种改良筛选提供理论依据。

我们研究发现，水稻分泌蛋白OsFID1能够响应病原真菌侵染。OsFID1缺失水稻突变体对真菌抗性显著下降，过表达OsFID1显著增强对稻瘟菌、稻曲病的抗性。说明OsFID1参与水稻对稻瘟病、稻曲病的抗病过程。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何提高水稻对稻瘟病和稻曲病的抗性。

为解决上述技术问题，本发明的目的可通过以下技术方案实现：

OsFID基因在提高植物对真菌性病害抗性中的应用，所述OsFID基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。

本发明所提供的提高水稻抗稻瘟病和稻曲病的蛋白名称为OsFID1，为如下SEQ IDNO.2所示的蛋白质，由258个氨基酸组成。

为了便于水稻转基因超表达OsFID1基因，可在SEQ ID NO.2所示的蛋白质羧基端连接如SEQ ID NO.3的FLAG蛋白标签，形成一个如SEQ ID NO.4的融合蛋白。

本发明所述的超表达载体为pCAMBIA1300，如图1所示，并命名为pCAMBIA1300-OsFID1-Flag。

本发明所述的真核转化农杆菌感受态为GV3101。

本发明提供了OsFID1蛋白质在调控植物抗病性中的应用。

本发明提供了OsFID1蛋白质提高转基因植物抗病性能力的作用。

本发明提供了OsFID1蛋白质在植物育种过程中的应用。

本发明提供了水稻相关基因在稻瘟病、稻曲病和白叶枯病侵染后的mRNA水平的变化，如图2，所用定量引物如表1。

表1Actin及相关基因的定量引物序列

上述应用中，所述蛋白质为提高植物抗病性具体表现为如图3。

上述应用中，所述植物为单子叶水稻日本晴NIP(OryzaSativaL.spp.Japonica,varNipponbare,AAgenome)，所述病原菌为水稻稻瘟病菌RB22，稻曲病菌HWD-2，和黄单胞菌PXO99。