[发明专利]一种用于Western Blot的抗体孵育设备在审
申请号: | 202310040430.5 | 申请日: | 2023-01-13 |
公开(公告)号: | CN116008529A | 公开(公告)日: | 2023-04-25 |
发明(设计)人: | 黄玉梅;雷源保;唐发清;吕春柳 | 申请(专利权)人: | 湖南省肿瘤医院 |
主分类号: | G01N33/531 | 分类号: | G01N33/531 |
代理公司: | 长沙楚为知识产权代理事务所(普通合伙) 43217 | 代理人: | 李大为 |
地址: | 410013 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 western blot 抗体 孵育 设备 | ||
本发明公开一种用于Western Blot的抗体孵育设备,包括顶端开口的孵育盒以及置于所述孵育盒内且与所述孵育盒左右滑动连接的多个挡板结构,所述挡板结构将所述孵育盒分隔成多个孵育空间,所述孵育盒包括内壳体,所述内壳体包括四周的内壁、底部的底板以及连接所述内壁与所述底板的过渡板;所述底板的长度等于内壁的长度,且宽度小于内壁的宽度,所述挡板结构上设有弹性密封层且与所述过渡板和底板密封连接;本发明挡板结构可以左右滑动,且可根据需要检测的蛋白种类的多少调节孵育空间的数量,能同时孵育一张膜上不同分子量蛋白的抗体,省去多次洗膜再敷抗体的步骤,避免了抗原的丢失;能同时获得对应的特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
技术领域
本发明涉及生物实验技术领域,特别涉及一种用于Western Blot的抗体孵育设备。
背景技术
Western Blot是通过电泳、转膜将分离后的细胞或组织中的蛋白转移到固相支持物PVDF/NC膜等上,然后用特异性抗体检测某特定蛋白质。与待检测蛋白特异性结合的为“一抗”,与“一抗”结合用于显色标记用的为“二抗”(也适用于直标“一抗”)。然后通过底物化学发光等显色方法,对细胞或组织内某种蛋白进行识别和/或对其表达水平进行检测。
现有的孵育方法是将带有细胞或组织中蛋白的PVDF/NC膜分别裁剪为需要孵育的多张膜,然后分别用抗体进行孵育,此方法裁剪过程容易损坏固相载体膜的使用功能,并可能引起实验者对蛋白条带的误用或者混淆等情况,影响检测;另一种方法是先进行一种抗体孵育后,洗脱后再进行下一种抗体孵育,此方法操作复杂且可能导致抗原的减少或者丢失,从而影响检测的准确性。
发明内容
发明的目的在于提供一种用于Western Blot的抗体孵育设备,解决了裁剪过程容易损坏固相载体膜的使用功能、洗脱后再进行下一种抗体孵育,此方法操作复杂且影响检测的准确性以及如何同时获得对应的特定蛋白质的在所分析的细胞或组织中表达情况的信息的问题。
本发明是这样实现的,一种用于Western Blot的抗体孵育设备,所述孵育设备包括顶端开口的孵育盒以及置于所述孵育盒内且与所述孵育盒左右滑动连接的多个挡板结构,所述挡板结构将所述孵育盒分隔成多个孵育空间,所述孵育盒包括内壳体,所述内壳体包括四周的内壁、底部的底板以及连接所述内壁与所述底板的过渡板,所述底板的长度等于内壁的长度,且宽度小于内壁的宽度,所述挡板结构上设有弹性密封层且与所述过渡板和底板密封连接。
挡板结构上设有与过渡板和底板密封连接的密封层,带有细胞或生物组织样品的固相载体膜置于挡板结构与所述底板之间,在向孵育空间加入淹没固相载体膜的抗体,在密封层的配合下,将固相载体膜分成多个孵育区,根据孵育的需要,在孵育区分别加入不同的特定抗体进行孵育,从而能同时获得对应的特定蛋白质的在所分析的细胞或组织中表达情况的信息;挡板结构可以左右滑动,从而可根据所需蛋白的分子量对固相载体膜进行分隔,且可根据需要检测的种类的多少调节孵育空间的数量;能同时孵育一张膜上不同分子量蛋白的抗体,省去多次洗膜再敷抗体的步骤,避免了抗原的丢失。
本发明的进一步技术方案是:所述挡板结构包括板本体、滑块以及弹簧,所述板本体顶部开设有条形槽用于将所述板本体向上提起,所述滑块两端设有与所述孵育盒顶部滑轨滑动连接的滑轮,所述弹簧一端与所述滑块连接另一端与所述本体顶部连接,所述弹簧自然伸长状态下所述密封层与所述过渡板和底板密封连接。
由于所述底板的长度等于内壁的长度,且宽度小于内壁的宽度,在挡板结构需要滑动时,通过条形槽将板本体向上提起,弹簧压缩,此时的密封层与内壳体之间有间隙,方便移动且不会引起密封层的磨损,移动到位后,松开手,此时的弹簧处于自然伸长状态,使得板本体向下运动从而密封层与底板和过渡板接触密封,此时的孵育空间底部为密封空间,避免不同的特定抗体分别进行孵育时互相之间有影响,方便观察检测结果且保证检测结果的准确性。
本发明的进一步技术方案是:所述板本体上设有水平的限位凸起,所述限位凸起的高度低于所述密封层顶部的高度。
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