[发明专利]抗人IL-17A蛋白的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明涉及本发明涉及抗人IL‑17A蛋白的单克隆抗体、包含该抗体的试剂盒及其在检测人IL‑17A中的应用。将包含所述抗人IL‑17A蛋白的单克隆抗体检测试剂盒用于检测人血清中的IL‑17A，灵敏度高，特异性强。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及抗人IL-17A蛋白的单克隆抗体、包含该抗体的试剂盒以及在检测人IL-17A蛋白中的应用。

背景技术

细胞因子是由多种免疫细胞和某些非免疫细胞经刺激而产生的一类小分子蛋白质，其种类繁多，并参与人体多种重要生理机能，如机体免疫反应和炎症反应。细胞因子中的白介素17(IL-17)家族主要有6种亚型(IL-17A至IL-17F)，其中IL-17A与IL-17F的氨基酸序列同源性最高，两者保持着约50％的同源性，我们通常说的IL-17是指IL-17A。IL-17A在各种感染性疾病、炎症和自身免疫性疾病以及癌症中均发挥着关键作用，在接触性皮炎、哮喘和类风湿性关节炎患者血清中均检测到IL-17含量的增加。

研究表明，在疾病的发展过程中对病人体内的细胞因子水平进行监测，可诊断早期感染、预警细胞因子风暴、及时发现疾病转重倾向，及时治疗，避免或降低病情恶化风险等，提高临床治疗的有效率。而IL-17A作为细胞因子中的一名重要成员，其血清检测结果可辅助多种疾病的临床诊断和预后。目前IL-17A的检测方法主要有酶联免疫吸附法、化学发光技术、流式检测技术等，因此优良的IL-17A配对抗体对于患者血液及细胞样品的准确检测至关重要。

发明内容

为满足患者血液及细胞样品的IL-17A含量检测的需求，作为关键原料的IL-17A配对抗体的灵敏度及特异性越高越好，因此本发明制备并筛选了大量抗人IL-17A单克隆抗体，最终获得高灵敏度及高特异性的最佳配对检测抗体。

本发明获得的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体，能与另一杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体配对并识别IL-17A，同时可应用于酶联免疫吸附、化学发光、流式检测等平台进行IL-17A的检测与筛查，灵敏度及特异性高。

本发明的第一方面提供了一种杂交瘤细胞株，其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO.62980。

所述杂交瘤细胞株的分类命名为杂交瘤细胞株，其保藏在广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏号为GDMCC No.62980，保藏日期为2022年11月16日。

在一些实施方式中，所述杂交瘤细胞株能产生结合人IL-17A蛋白的单克隆抗体。

本发明的第二方面提供了抗人IL-17A蛋白的单克隆抗体。该抗体由所述的杂交瘤细胞株分泌。

本发明的第三方面提供了第二方面的单克隆抗体的生产方法，包括以下步骤：

(1)用IL-17A抗原免疫动物，取免疫动物脾细胞与骨髓瘤细胞融合，并用HAT筛选获得杂交瘤细胞株；

(2)使用获得的杂交瘤细胞株，通过腹水诱生法获得腹水，再采用亲和层析法纯化腹水获得单克隆抗体。

在一些实施方式中，所述IL-17A抗原具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列和/或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

本发明的第四方面提供了一种试剂盒，其包含第一单克隆抗体，所述第一单克隆抗体由保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO.62980的杂交瘤细胞株分泌。

在一些实施方式中，所述试剂盒为酶联免疫试剂盒化学发光试剂盒、流式检测试剂盒、胶体金免疫试剂盒、放射免疫试剂盒或荧光免疫试剂盒。

在一些实施方式中，所述试剂盒还包括所述第一单克隆抗体的配对抗体。