[发明专利]一种常夏石竹组织培养的方法

权利要求书

1.一种常夏石竹组织培养的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1：选取常夏石竹带有生长点的茎作为外植体；对外植体进行消毒处理后备用；

步骤2：将外植体切成0.8～1.5cm小段接种于初代诱导培养基上，进行初代诱导培养分化出丛生芽；

所述初代诱导培养基为：

MS+6 BA 0.5～1.5mg/L+NAA 0.1mg/L+KT 0.01～0.1mg/L；

所述初代诱导培养的条件为培养温度25±2℃，光照时间12～14h/d，光照强度3000～4000Lx，白天自然光照补光，培养周期是14～20天；

步骤3：将初代诱导培养的丛生芽在继代培养基上培养；

所述继代培养基为：

MS+6-BA 0.5～1.5mg/L+NAA 0.1mg/L+KT 0.01～0.1mg/L；

所述的继代培养条件为培养温度25±2℃，光照时间12～14h/d，光照强度3000～4000Lx，白天自然光照补光，培养周期是14～20天；

步骤4：将继代培养基中长势较好的苗转入生根培养基中，诱导生根；

所述生根培养基为：MS+IBA 0.1～0.5mg/L；

所述的生根培养条件为培养温度25±2℃，光照时间12～14h/d，光照强度3000～4000Lx，白天自然光照补光，培养周期是8～17天；

步骤5：将上述诱导生根后的常夏石竹生根苗进行炼苗和移栽。

2.根据权利要求1所述的一种常夏石竹组织培养的方法，其特征在于：所述初代诱导培养基为：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+KT 0.1mg/L；所述继代培养基为：MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+KT 0.1mg/L；所述生根培养基为：MS+IBA 0.3mg/L。

3.根据权利要求1所述的一种常夏石竹组织培养的方法，其特征在于：所述初代诱导培养的条件为培养温度25±2℃，光照时间12h/d，光照强度3500Lx，白天自然光照补光，培养周期是20天；所述的继代培养条件为培养温度25±2℃，光照时间12h/d，光照强度3500Lx，白天自然光照补光，培养周期是20天；所述的生根培养条件为培养温度25±2℃，光照时间12h/d，光照强度3500Lx，白天自然光照补光，培养周期是15天。

4.根据权利要求1所述的一种常夏石竹组织培养的方法，其特征在于：所述步骤1中常夏石竹外植体的消毒处理过程为：剪取常夏石竹植株嫩茎，去除叶片留茎段，茎段长度剪为2～4cm小段，放入加有洗洁精的自来水中浸泡30min，再用自来水冲洗2h去掉表面污渍，转入超净工作台内进行消毒，在外植体清洗仪中：75％酒精振荡清洗40s，无菌水清洗1～3遍，再放入加有2滴吐温20的0.1％升汞溶液中振荡消毒10min，用无菌水清洗5遍，每次30s以上，于无菌滤纸上吸干水分备用。

5.根据权利要求1所述的一种常夏石竹组织培养的方法，其特征在于：所述步骤2和步骤3的接种过程中，保证外植体有2～3个生长点，且外植体的1/2插入培养基。

6.根据权利要求1所述的一种常夏石竹组织培养的方法，其特征在于：所述步骤5还包括常夏石竹生根后的炼苗阶段，具体方法为：将常夏石竹组织培养瓶盖子拧松后，放置于的温室苗床上，放置1天后，将常夏石竹组织培养瓶盖子拧开，放置2天，期间每天喷水3次清水保湿。

7.根据权利要求1所述的一种常夏石竹组织培养的方法，其特征在于：所述步骤5还包括常夏石竹生根后的移栽阶段，具体方法为：从培养瓶中取出常夏石竹组培苗，用清水将组培苗根部粘附的培养基冲洗干净，然后移栽至穴盘培养基质中。

8.根据权利要求6所述的一种常夏石竹组织培养的方法，其特征在于：所述苗床培养基质为泥炭∶蛭石∶珍珠岩∶河沙为5∶2∶1∶1。