[发明专利]一种测定饮料中绿原酸类物质的方法

说明书

本发明涉及生物活性物质检测技术领域，具体公开了一种测定饮料中绿原酸类物质的方法。采用本发明的方法可以较好的分离新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、1,5‑二咖啡酰奎尼酸等7种绿原酸，可以一次性检测饮料中7种绿原酸，该检测方法具有灵敏度高、定性定量准确等优点。通过比较流动体系，当流动相体系为2mmol/L甲酸铵(含0.1％甲酸)‑乙腈时有较高的响应和较好的分离效果，满足要求。

技术领域

本发明涉及生物活性物质检测技术领域，尤其是涉及一种测定饮料中绿原酸类物质的方法。

背景技术

茶饮料中含有丰富的生理活性物质，目前已知的化学成分有500多种，主要有咖啡碱、可可碱、茶叶碱、游离的茶素、茶多酚及多种维生素、矿物质、蛋白质和糖类等物质，其中绿原酸是茶多酚中的酚酸类物质，是部分茶饮料的功能性评价指标之一。

绿原酸(chlorogenic acid，CGA)是由咖啡酸和奎尼酸组成的缩酚酸，广泛存在于多种植物之中，具有多种药理作用，如抗菌、止血、消炎、利胆等，临床上用于治疗急性细菌感染等引起的疾病，可起到止血、增加白血球、抗病毒、缩短血凝时间等作用。目前我国尚无茶饮料中绿原酸的检测方法标准，更未对其含量作限量要求。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种测定饮料中绿原酸类物质的方法。采用本发明的方法能较好的分离绿原酸，一次性可以检测饮料中7种绿原酸，灵敏度高、定性定量准确。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

第一目的，本发明提供了一种测定饮料中绿原酸类物质的方法，包括以下步骤：

1)标准品溶液的制备：

分别称取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、1,5-二咖啡酰奎尼酸标准品，用甲醇溶解并稀释，配制成浓度分别为10ng/mL-500ng/mL的新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、1,5-二咖啡酰奎尼酸混合标准工作溶液；

2)供试品溶液的制备：

取饮料溶液，加入甲醇混匀，水浴超声，过滤，即得供试品溶液；

3)液相色谱-串联质谱测定：

吸取标准品溶液和供试品溶液注入色谱柱，测定，即得；

其中，色谱条件为：

柱温：25-40℃；

流动相：2mmol/L甲酸铵(含0.1％甲酸)-乙腈；

流速：0.3-0.4mL/min；

进样量：2.0μL；

供试品溶液中绿原酸类物质的含量按式(1)计算：

X——供试品溶液中绿原酸类物质的含量mg/kg；

C——供试品溶液色谱峰对应的绿原酸浓度ng/mL；

V——定容体积mL；

m——样品称样量g；

f——供试品溶液稀释的倍数。

采用本发明的技术方案可以较好的分离新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、1,5-二咖啡酰奎尼酸等7种绿原酸，可以一次性检测饮料中7种绿原酸，该检测方法具有灵敏度高、定性定量准确等优点。

通过比较流动体系，当流动相体系为2mmol/L甲酸铵(含0.1％甲酸)-乙腈时有较高的响应和较好的分离效果，满足要求。