[发明专利]一种抗菌抗炎双活性多肽及其应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种抗菌抗炎双活性多肽及其应用，本发明的双活性多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明的双活性多肽具有良好的生物相容性，能够针对性的抑制牙周炎致病菌如牙龈卟啉单胞菌和伴放线聚集杆菌的生长，抑制细菌形成生物膜，同时具有高生物安全性和无细胞生物毒性，并可以避免细菌产生耐药性。此多肽还可通过逆转炎症细胞的表型以及抑制促炎细胞因子释放方式来预防和治疗牙周炎。动物试验显示，双活性多肽可以有效的预防和治疗牙周炎，显示了在牙周炎治疗领域中的巨大应用价值，还可以用于相关菌群感染性疾病的治疗及用作植入性器械的表面涂层等。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种抗菌抗炎双活性多肽及其应用。

背景技术

严重牙周炎是人类第六大流行疾病，是临床口腔最为常见的疾病之一，也是导致人类失牙的最主要疾病，严重牙周炎导致的牙齿缺失影响全球10-15％的人口。另外，牙周炎症还与糖尿病、心脏病、阿尔兹海默症、骨质疏松症等全身疾病密切相关。牙周炎患者在机械治疗后由于口腔卫生维持差，不按时复诊等原因，导致大部分牙周炎患者的病情愈后差且容易复发。药物治疗作为牙周炎机械治疗后重要辅助治疗方法，存在单一用药不能有机结合抗菌和抗炎双重功效，且常用的抗生素会产生耐药性等弊端。寻求一种有机结合抗菌抗炎双重功效且不易产生耐药性的药物应用于牙周炎的治疗是目前的研究需求。

抗菌肽是宿主对抗外源性病原微生物的天然防御机制。其基本作用机制是破坏细菌的质膜结构，引起细胞内容物大量渗出，最终导致病原微生物死亡，因此无明显耐药性。此外，抗菌肽具有无色、无臭、无刺激、无染色等优点，并具有广谱抗菌性能等。近年来已成为临床医学、分子免疫学和分子生物学研究的热点之一。LL-37来源于hCAP-18,hCAP-18是目前发现的唯一的人类组织蛋白抗菌肽。LL-37是维持在hCAP-18C端的活性小分子多肽。LL-37对牙周炎的致病菌，如牙龈卟啉单胞菌、放线菌、中间普氏菌、具核梭杆菌等敏感。LL-37是通过形成离子通道的方式来破坏细菌细胞膜。此外，LL-37可以快速与细菌膜上的内毒素LPS结合，从而中和细菌。尽管LL-37具有如此显著的抗菌性能，但其仍存在有细胞毒性和不能有效修复炎症引起的损伤的缺点。一种来源于Chemerin的抗炎肽C15具有这两个优点。Chemerin是一种作为化学趋化蛋白存在于一系列人类炎性分泌物中的趋化蛋白。Chemerin具有良好的生物相容性。ChemR23是G蛋白偶联受体，可与Chemerin有效识别并结合，其主要由单核细胞、巨噬细胞和浆细胞树突状细胞表达。具有抑制中性粒细胞和单核细胞的募集，抑制促炎细胞因子的释放，促进抗炎细胞因子的释放等功能。趋化因子可通过蛋白水解作用裂解产生有效的抗炎产物，在较低的摩尔浓度下即可发挥较强的抗炎作用。在以往的研究中，Chemerin除了有效抑制TNF-α等促炎细胞因子外，还限制了炎症细胞在创面部位的集聚，直接诱导创面早期愈合。Chemerin还可以逆转巨噬细胞的炎症表型，而逆转后的M2巨噬细胞表型往往与改善创面修复相关。

鉴于上述缺陷，本发明创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本发明。

发明内容

本发明的目的在于解决如何制备有机结合抗菌抗炎双重功效且不易产生耐药性的药物应用于牙周炎的治疗的问题，提供了一种抗菌抗炎双活性多肽及其应用。

为了实现上述目的，本发明公开了一种抗菌抗炎双活性多肽，所述抗菌抗炎双活性多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述抗菌抗炎双活性多肽采用固相合成法合成，选用2Cl树脂为起始载体，以Fmoc-保护氨基酸为缩合原料，依次缩合双活性多肽氨基酸序列中相对应的氨基酸，将多肽进行切割沉聚反应，纯化后冻干。

所述多肽具有抗炎作用，可以调控巨噬细胞的分化，逆转和减少巨噬细胞的炎症表型，减少促炎细胞因子的释放，增加抗炎细胞因子的释放，从而缓解牙周支持组织的炎症状态，可用于相关炎症性疾病的治疗。