[发明专利]一种紫薇花粉的收集保存方法

说明书

本发明公开了一种紫薇花粉的收集保存方法，属于生物技术领域，具体包括以下步骤：(1)待紫薇盛花期采集紫薇花，收集带有花粉的花药和/或花粉；(2)将收集得到的带有花粉的花药和/或花粉置于装有硅胶的容器中，室温下干燥，再转移至液氮中快速冷冻，然后在–75℃‑–80℃超低温下保存；进一步的，将超低温保藏的花粉材料流水化冻后可恢复活力，本发明方法能够有效延长花粉的活力保存时间，适用于‘红火箭’紫薇花粉或‘四川红’紫薇花粉等多种紫薇花粉的保藏，由此弥补了紫薇花粉长效贮藏方法的空白，使紫薇花粉的长期保存、时空不遇的紫薇品种杂交变得可行。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种紫薇花粉的收集保存方法。

背景技术

紫薇(Lagerstroemia indica L.)为千屈菜科紫薇属落叶灌木或小乔木，树姿优美、花色鲜艳、花期长，还可有效吸收有害气体、吸滞粉尘，是夏季重要的观赏植物，具有很高的园林应用价值。我国是紫薇的原产地和主要分布地，种质资源非常丰富，但育种工作起步较晚，进入21世纪才开展大量研究，亟需通过杂交育种等方式培养更优质的紫薇新品种。

花粉作为植物种质的主要形式，包含了各种基因类型，是紫薇杂交育种的重要材料。在开展杂交育种时需保证花粉在具有活力时到达柱头，而不同紫薇品种间常存在花期或空间不遇的问题，且花粉在自然条件下的寿命仅有短短数天，给紫薇的杂交育种工作带来了极大不便，因此极有必要开展紫薇花粉保存的相关研究。

此前针对紫薇花粉保存技术的研究多集中于低温(4℃或–20℃)保存和有机溶剂(如丙酮、苯)保存等方面，关于其长期储藏的报道尚不多见。王瑞文等研究表明紫薇新鲜花粉在室温下贮藏5d左右即会失活(王瑞文,杨彦伶,王瑞静,等.紫薇花粉生活力变化及柱头可授性的研究[J].湖北农业科学,2010,49(11):2829-2832.)，虽然有研究表明对紫薇新鲜花粉进行预干燥处理能够增加其在4℃低温环境下的保存时间，但至多25d便基本失去全部活性，难以满足花期间隔时间长的品种的杂交需求。而有机溶剂贮藏不但效率低且仅能使花粉活力维持3-6d，还存在废液处理复杂、易造成环境污染等问题。因此亟需探索出一种简便易行、环保绿色的紫薇花粉长效保存方法。

超低温保存是指在–75℃以下的低温条件下保存生物材料，不仅可以有效的保持生物材料的遗传稳定性，还能避免病虫害的引入；现有技术中，超低温保存技术已被应用于花粉保存，如公开号为CN111493065A的中国专利文献公开了一种辣木花粉的超低温保存方法，该发明方法中，将采集得到的辣木花粉预冻后，再置于-80℃的冰箱中保存或将预冻后的辣木花粉置于-196℃的液氮中保存，解冻时，将保存的花粉置于控温控湿的气候箱中解冻，该发明方法能够将辣木花粉保存2-3个月；公开号为CN111758721A的中国专利文献公开了一种大葱花粉的保存方法，该发明方法中，首先将大葱花粉干燥，再进一步密封后于0℃-8℃的条件下预冷冻；预冷冻后的大葱花粉先于–15℃-–25℃条件下冷冻，后于–70℃-–80℃保存后化冻，大葱花粉经该发明方法保存90天后用于人工授粉，授粉率高达88.02％。

然而，不同植物其花粉所含的化学物质不同，生理特点和反应酶的特性也不相同，其他物种花粉保存方法不能简单地转用于保存紫薇花粉。因此，亟需提供一种适用于延长紫薇花粉寿命的超低温保存方法。

发明内容

为保持紫薇花粉活力、克服杂交育种中花期或空间不遇的问题，本发明提供了一种简易高效的紫薇花粉的收集保存方法、保存及活力测定方法，该方法能有效延长花粉的活力保存时间，保持花粉的萌发率。

具体采用的技术方案如下：

一种紫薇花粉的收集保存方法，包括以下步骤：

(1)待紫薇盛花期采集紫薇花，收集带有花粉的花药和/或花粉；

(2)将收集得到的带有花粉的花药和/或花粉置于装有硅胶的容器中，室温下干燥，再转移至液氮中快速冷冻，然后在–75℃–80℃超低温下保存。