[发明专利]一种大鼠抗小鼠CD137抗体或其功能性片段、工具抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种大鼠抗小鼠CD137抗体或其功能性片段、工具抗体及其应用，涉及生物技术领域。该抗体具有高特异性、高亲和力、且抗体与小鼠CD137分子的结合表位明确，可用于鼠CD137分子的检测。特别是本发明所提供的大鼠抗小鼠CD137抗体具有优良的T细胞激活效应，并表现出良好的体内抑制肿瘤效应。据此，本发明提供的大鼠抗小鼠CD137抗体不仅对于开发研究CD137单抗、双靶向抗体具有重要意义，也将为探寻特定类型CD137抗体在小鼠肿瘤模型的中的作用机制、以及基于CD137抗体的联合治疗新组合提供一种独特的研究工具，潜在地指导新一代CD137抗体药物研发。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种大鼠抗小鼠CD137抗体或其功能性片段、工具抗体及其应用。

背景技术

PD-1抗体为代表的免疫检查点治疗真正开启了肿瘤免疫治疗新时代，目前一些国产PD-1抗体药已经进入医保，使更多患者获益。但PD-1抗体药有效率普遍偏低，平均为12％，在非小细胞肺癌不足20％，面临提高疗效实际问题。科学家们发现PD-1以外免疫调节新靶点是深化免疫治疗研究的重要方向。除外PD-1、CTLA-4和LAG3等负性免疫检查点分子，另一类激活型免疫检查点分子，如CD40，OX40，CD137(4-1BB)靶点等也被用于T细胞的肿瘤调节治疗研究，是肿瘤免疫治疗提高疗效扩大受益患者人群的重要研究方向，在国际上是备受关注。

CD137是最受关注的分子之一，CD137是TNFRSF成员之一，该家族与免疫细胞活化有关，呈抗原诱导性表达，尽管CD137表达广泛，但主要表达于T细胞，偏于CD8+T细胞和NK细胞，该两群细胞是肿瘤免疫的核心细胞。临床前模型已经印证CD137信号调控抗肿瘤活性主要由CD8+T介导，NK可以补偿CD8+T功能缺损，从而两群细胞通过功能互补共同根除小鼠肿瘤。此外，CD137信号修饰的CAR-T细胞更为有效，已经被美国食品药品监督管理局(Foodand Drug Administration，FDA)和药监局准入治疗B细胞白血病和淋巴瘤。积累的研究表明CD137信号延长CD8+T存活和形成记忆T细胞。

早期国外有两种CD137抗体正在进行临床实验：Urelumab(BMS-663513，byBristol-Myers Squibb)，显示出明确的体内免疫激活效应，然而存在过度的免疫刺激现象，表现为非特异性免疫激活，特别是作用于肝脏和造血组织，导致一定程度的肝损伤表征，低剂量应用可能阻碍其临床抗肿瘤效能；Utomilumab(PF-05082566，by Pfizer)具有良好系统毒性把控的抗体，显示出偏弱的体内抗瘤活性。这两款早期开发的抗体，尽管发现存在一定缺陷，但都仍然在临床实验中，采用了降低用量和联合PD-1/PD-L1抗体提高疗效的策略。现在全球共有16款CD137抗体的在研项目，近年来我国开始立足研发更为安全和有效的新一代CD137抗体，国内共有3家企业参与CD137靶点新药研发，均为抗CD137单抗，其中1款处于I期临床阶段，2款处于临床前研究阶段，仍然处于早期临床阶段。

由于人体实验的限制，临床前实验，特别是临床前小鼠体内实验，是发展新一代兼具低副作用和高效抗瘤抗体的重要平台。目前国际上大鼠CD137抗体限于国际上早期产出的一组抗体，国内尚没有大鼠抗小鼠CD137生产报道，整体大鼠抗小鼠CD137抗体资源少，限制着开发研究。不同CD137抗体具有不同特征，包括结合表位、亲和力、类别、继而决定了它们不同的免疫调节活性。为进一步推进CD137抗体药物发展，发挥更强的抗肿瘤效用，同时限制CD137抗体相关不良反应，亟需制备多样性和不同特色的大鼠抗小鼠CD37抗体，为小鼠体内进行的药物实验提供筛选开发和测试评价依据，深化抗肿瘤活性研究，这不仅可以对疾病发生机理和潜在机制进行深入探讨，还能为切实促进CD137抗体药物的研究开发与临床试验进程，并减少了临床前测试的时间成本，同时也降低临床实验风险，加速新一代抗人CD137抗体研发。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容