[发明专利]除病毒过滤方法

说明书

本发明公开了除病毒过滤方法，是低浓度料液所采用的平板膜的垂直过滤，包括漂洗、平衡、上样、淋洗，上样为将经过纯化后的蛋白类料液加载在除病毒过滤膜装置，进行过滤，其中蛋白类料液包括盐酸精氨酸和盐酸组氨酸中的至少一种。本发明方案操作简单，适用性广，成本低廉，且不会对病毒去除率造成影响。

技术领域

本发明是关于生物制药技术，特别是关于一种除病毒过滤方法。

背景技术

2020年版《中国药典》和“ICH Q5A”对于生物制品的病毒安全性有着明确要求，由人的、动物的组织或者体液提取的制品、动物源性单克隆抗体及真核细胞表达的重组制品，下游生产工艺中必须包含稳健的病毒清除步骤。最常用的病毒清除工艺包括病毒灭活和病毒过滤。除病毒过滤是基于粒径排阻原理，能够稳健清除各类病毒，且可进行工艺后完整性测试确保工艺的有效性，已被业界广泛接受。

除病毒膜过滤技术是物理拦截，故其对产品质量影响较小，它与其他病毒灭活技术互为补充，在治疗用生物制品生产中得到了广泛的应用，依据纳米级别孔径的膜对病毒颗粒的物理拦截作用而实现病毒去除的，除病毒膜过滤器通常含有纳米孔径的高分子聚合膜，主要依靠分子大小拦截作用，此外还有吸附机制：拦截作用在过滤时，大于膜孔径的物质(如病毒颗粒)被滤膜截留；而小于膜孔径的蛋白，可通过膜孔至滤膜下游。吸附机制部分小于膜孔径的物质也可能通过吸附作用(如静电吸附、范德华力、氢键等)而被吸附在膜表面或膜孔内部。

工艺开发中需要考察过滤器对于料液的处理速率、通量、收率及质量影响。除病毒过滤的载量、滤速和回收率受过滤样品缓冲液组成、电导、pH、样品纯度、样品浓度、样品蛋白特性等因素影响，这些因素在过滤的过程中会导致不同程度堵膜情况。

通过优化以上这些因素来开发除病毒过滤工艺是非常费时费力的，且效率较低，可能最后也很难达到理想的过滤效果，加之除病毒过滤器的成本昂贵，因此，一种通用性好，可以显著改善过滤通量和回收率的方法对蛋白类生物产品的除病毒过滤工艺开发是具有非常重要的意义。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

本发明的目的在于提供一种除病毒过滤方法，提供了一种提高除病毒过滤膜过滤通量的方法能够有效解决除病毒过滤的膜通量较低，同时蛋白损失较多的问题，提供的技术方案操作简单，适用性广，成本低廉，且不会对病毒去除率造成影响。

为实现上述目的，本发明的实施例提供了除病毒过滤方法，是低浓度料液所采用的平板膜的垂直过滤，包括漂洗、平衡、上样、淋洗，上样为将经过纯化后的蛋白类料液加载在除病毒过滤膜装置，进行过滤，其中蛋白类料液包括盐酸精氨酸和盐酸组氨酸中的至少一种。

在本发明的一个或多个实施方式中，蛋白类料液中蛋白的浓度为小于15mg/ml。

在本发明的一个或多个实施方式中，蛋白类料液中添加的盐酸精氨酸的浓度为0.1-0.2M。

在本发明的一个或多个实施方式中，蛋白类料液中添加的盐酸组氨酸的浓度为0.05-0.1M。

在本发明的一个或多个实施方式中，蛋白类料液中同时添加0.1M盐酸精氨酸和0.05M盐酸组氨酸。

在本发明的一个或多个实施方式中，漂洗为用漂洗液对除病毒过滤膜装置进行冲洗。优选的漂洗液为注射水。

在本发明的一个或多个实施方式中，漂洗为恒压过滤：压力控制在29psi，漂洗液用量为大于等于100L/m²。

在本发明的一个或多个实施方式中，平衡为用平衡液对除病毒过滤膜装置进行平衡。优选的平衡液为20mM PB pH 7.0。